【讨论】方法开发过程中一般要遵循哪些原则或技巧

应助达人

请北北看药典附录后面有的药品分析方法验证。

如果药典中没有的呢？

应助达人

北北，我说的不是具体品种怎么做，而是说有个指导原则
中国药典附录XIX药品质量标准分析方法验证指导原则
里面做了一些要做哪些项目的规定，但没有技巧哦。

都是有具体规定的，技巧很难！

我感觉应该先找标准，无标准的向标准靠！

个人经验：
1）先看分子量和分子结构；
2）根据分子量大小选色谱柱（分子量超过1W的分子选300A的柱子，小于1W选120A的就用了；
3）先在C18柱子上花至少30min0～100％甲醇的梯度，看看化合物在C18上面的保留能力；
4）再根据出峰的时间，进一步调整，总的规则是，先把目标化合物的峰让它跑出来，并要求获得重现性，调整好出峰时间；然后再调整好峰形，使其峰形对称性良好。

注意：通常在方法开发的时候，如非迫不得已，最好是用流动相来溶解样品，做梯度的朋友则用初始流动相来溶解样品。这样会减少很多鬼峰出现的几率，同时会改善主峰的峰形，比如“前拖”是不用流动相溶解最容易出现的状况。

谢谢，什么情况下需考虑加缓冲溶液呢

感觉很专业，阁下搞研发的？

有两种情况下需要考虑加缓冲盐溶液：
1）在极端条件下如纯水条件下，峰还是出来太快，这个时候就需要加入缓冲盐，然后再调节pH来考查pH对样品保留时间的影响；
2）峰出来了，但是峰形比较差，前拖或后拖，这个时候也需要考虑加入缓冲盐溶液，通常加入浓度为50mmol/L时认为缓冲盐的量应该是足够大了，但仍需视情况来定；加入缓冲盐后如果峰形还是不太好，还需要进一步的考查pH的影响。
这两个方面如果能结合分子结构进行调整，并加以经验总结，将会事半功倍。