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【原创】电化学发光检测

毛细管电泳(CE)

  • 电化学发光(ECL)是在电极上施加一定的电压使电极反应产物之间或电极反应产物与溶液中某组分进行化学反应而产生的一种光辐射现象。电化学发光与普通化学发光相同之处是二者的发光均由进行能量电子转移反应的组分所产生,而不同之处是电化学发光由电极上施加的电压所引发和控制,普通化学发光是由试剂的混合所引发和控制的。

    电化学发光与毛细管电泳结合,涉及ECL试剂的加入方式,电泳高压电场的隔离以及ECL的发光效率问题。

    因为是在电极上发生电化学反应的,所以电泳高压电场会对电化学检测产生较大影响,高压电场不隔离的话容易损坏电化学分析仪。
    另外,检测部分设计上是毛细管出口必须对准电极表面。

    电化学发光检测基本包括两大部分。电化学部分和化学发光采集部分。电化学部分一般采用电化学分析仪(国内用上海辰华的较多),化学发光采集大多用中科院生物物理所的BPCL超微弱化学发光分析仪。

    几年前,国内中科院长春应化所和西安瑞迈仪器公司就已共同研制出了商品化的CE-ECL分析仪。

    先写这么多吧,开始实验了,另外一个问题:怎么今天不能插入图片?
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  • sunpengwjh

    第1楼2010/04/13

    精品,希望能继续关注论坛!

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  • czjbsa4105761

    第2楼2010/04/13

    德国Zahner公司去年年底也刚刚推出研发好的CIMPS-emit电化学发射光谱仪

    主要用于研究就有机光电装置(OPV),发光二极管(LED),有机发光二极管(OLED)

    主机依然采用德国ZAHNER的高性能电化学工作站,通过主机对光电化学池施加电压和电流信号,通过UV-VIS-IR谱仪可以获得发射光谱图。

    发光强度分布可以通过高灵敏度的检测器获得,发光体系的电化学参数,温度,PH,时间都可以通过软件自动获得

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  • plf0717

    第3楼2010/04/14

    续:

    钌配合物,特别是三联吡啶钌及其衍生物具有检测灵敏度高、发光条件简单且试剂稳定性好等优点。是作为毛细管电泳电化学发光检测最普遍的发光试剂,应用发展也很快。

    电化学发光与发光试剂的浓度和共反应试剂的浓度成正比;所以电化学发光检测法即可以用来检测样品中发光试剂的含量,也可以用来检测样品中发光共反应试剂的含量。

    目前西安瑞迈的商品化CE-ECL主要用来检测共反应剂含量。该类共反应剂含叔氨的化合物能取得较高的检测灵敏度,如三丙胺(TPA)、二丁基乙醇胺(DBAE)、一丁基二乙醇胺(BDEA)等。

    Ru (bpy)32+/TPrA体系电致发光机理

    Ru (bpy)32+ - e Ru (bpy)33+

    TPrA – e TPrA+ ·

    TPrA+ · TPrA · + H+

    Ru (bpy)33+ + TPrA ·[Ru (bpy)32+]* + 产物

    [Ru (bpy)32+]* Ru (bpy)32+ +



    但是,毕竟含叔胺基团的化合物数量是有限的;所以导致商品化的CE-ECL检测技术存在一定的局限性。

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  • sunpengwjh

    第4楼2010/04/14

    讲解的很详细,值得推广学习、!

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  • plf0717

    第5楼2010/04/15

    电化学发光作为毛细管电泳检测器,不需要任何光源,只需要光电倍增管或者其它的光电转换装置采集光信号,并对光信号进行测量比较,就能够达到物质定量分析的目的。但电化学发光反应往往需要添加1-2种甚至多种试剂,必然需要一个合适的接口把毛细管电泳分离的成分与外加试剂进行混合。由于毛细管电泳分离进样量少以及分离过程中需要施加高压电源,而电化学发光试剂的添加需要适当的溶液传输,给实验操作带来很多困难。所以电化学反应试剂在毛细管检测口的混合对于仪器操作的安全性和提高分离效率、检测灵敏度都非常重要,这也是电化学发光能否成功地作为毛细管电泳检测器的技术关键。

    -----摘自《电化学发光》

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  • i_am_ling

    第6楼2010/04/16

    非常感谢分享!

    plf0717(plf0717) 发表:电化学发光作为毛细管电泳检测器,不需要任何光源,只需要光电倍增管或者其它的光电转换装置采集光信号,并对光信号进行测量比较,就能够达到物质定量分析的目的。但电化学发光反应往往需要添加1-2种甚至多种试剂,必然需要一个合适的接口把毛细管电泳分离的成分与外加试剂进行混合。由于毛细管电泳分离进样量少以及分离过程中需要施加高压电源,而电化学发光试剂的添加需要适当的溶液传输,给实验操作带来很多困难。所以电化学反应试剂在毛细管检测口的混合对于仪器操作的安全性和提高分离效率、检测灵敏度都非常重要,这也是电化学发光能否成功地作为毛细管电泳检测器的技术关键。

    -----摘自《电化学发光》

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  • sunpengwjh

    第8楼2010/04/26

    能简单的用一两句话介绍一下文献的内容么?

    plf0717(plf0717) 发表:分享几篇ECL综述

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  • plf0717

    第9楼2010/04/30

    文献一:主要综述了钌配合物作为电化学发光试剂的一些相关应用。这些化合物的ECL反应具有水溶性好,试剂稳定,电化学行为可逆、发光
    效率高等优点,
    是研究最多应用最广的电致化学发光物质

    文献二:主要综述了电化学发光特点和一些体系及应用。

    sunpengwjh(sunpengwjh) 发表:能简单的用一两句话介绍一下文献的内容么?

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  • plf0717

    第10楼2010/04/30

    再讲讲CE-ECL联用的关键点。

    前面讲过CE-ECL联用存在一个高压电源的高压隔离问题。因为ECL用到的电化学分析仪所承受的电压一般很小,大概10V;超过承受电压电化学分析仪就容易被烧坏。

    (前几天带着电化学工作站跑到上海公司维修啊,,累啊)

    所以这一点比较关键。

    主要介绍一下目前我在做的高压隔离方法。通过氢氟酸刻蚀毛细管末端使其达到导电效果!

    当然也有采用裂缝式接口作高压导电负极端,这个不是太懂,也没有尝试,所以不作太多介绍。

    认为刻蚀接口制备简单、不引入死体积等优点,

    近年来被广泛应用作CE高压电场的隔离接口。

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