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【原创】毛细管内壁聚丙烯酰胺涂层总也不成功,怎么办?

毛细管电泳(CE)

  • 如题,因为要做DNA筛分,对毛细管内壁进行了涂层,可涂层总是很不稳定,或者根本键合不上去,做DNA筛分就更没有结果了。我用的是经典的改性方法,以前做都可以,成功率90%,可现在怎么也弄不好,着急!哪位做过这方面的东西,能否给指点一下问题究竟在什么地方。谢了!
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  • sunpengwjh

    第1楼2010/05/11

    键合的条件实验室自己优化的?还是参考文献的?有些文献报道是有所保留的!

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  • doris8976

    第2楼2010/05/12

    实验室自己优化的,不知道您做过这方面工作没,给点建议吧 :)

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  • tus13

    第3楼2010/05/12

    楼主是做痕量检验吧?
    我作学生时(七十年代末)作过蝮蛇DNA检验,那时侯样品足够多.是用聚丙烯酰胺凝胶分离蛋白质,再... ...,浓度的影响很大.能够做成功学生的不多.
    毛细管电泳分离蛋白没作过,不敢多说.

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  • userwzy

    第4楼2010/05/13

    灌胶后是不是多保持一会(30min)是不是会好些,冲得时候压力不要太大,运行的缓冲溶液是不是对涂层不友好?

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  • elvisnoxug

    第5楼2010/05/13

    是自由基引发吗?反应的条件控制的如何?

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  • sunpengwjh

    第6楼2010/05/13

    也做过这方面的,同样也是不稳定,不是涂层厚了,就是没有涂上,我们高温涂的,也是直接反应!效果也不是很好!

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  • doris8976

    第7楼2010/05/20

    先谢谢大家的回复!因为前面做成功率很高,也就没有去留意每一步的操作,感觉随便改性一下都可以成功的,但现在却怎么也涂不上去,郁闷之极!

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