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【求助】GPC的峰形这样是为什么?

液相色谱(LC)


  • 我的样品峰如图,最大那个峰是我的待测样品。可是峰形太差了,峰宽大概有7,8min吧。样品是酯类物质,不知道如何改善峰形啊?测试条件:THF流动相,流速1.0ml/min,柱温30,浓度2mg/ml.
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  • 有水有渝

    第1楼2010/06/07

    应助达人

    那个电压有多大,进样量少点看看,是第一次做这个物质,方法是标准方法吗?

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  • tigertooth

    第2楼2010/06/07

    这其实挺正常的,你的样品不可能都和标样一样峰型那么好看,高分子的样品往往就是一系列不同分子量的物质组成的,有时又包含什么聚集呀,交联呀 什么的。如果你能确定柱子没有超载,柱效正常,基本上没有什么问题。只是样品的成分稍微复杂一些。
    还有就是多做几针,看看重现性。如果重现性也没什么问题,基本就是你的样品的问题了。

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  • sophaloki

    第3楼2010/06/07

    电压大概30mv吧,第一次进这个物质,没有标准方法!所以出现这样的峰,我都不敢再做,我怕把柱子弄坏了!

    有水有渝(xky0230699) 发表:那个电压有多大,进样量少点看看,是第一次做这个物质,方法是标准方法吗?

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  • sophaloki

    第4楼2010/06/07

    我重复进了好几针都是这样的图!

    tigertooth(tigertooth) 发表:这其实挺正常的,你的样品不可能都和标样一样峰型那么好看,高分子的样品往往就是一系列不同分子量的物质组成的,有时又包含什么聚集呀,交联呀 什么的。如果你能确定柱子没有超载,柱效正常,基本上没有什么问题。只是样品的成分稍微复杂一些。
    还有就是多做几针,看看重现性。如果重现性也没什么问题,基本就是你的样品的问题了。

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  • tigertooth

    第5楼2010/06/07

    你把几次进针的图叠加比较一下,如果重现性很好,那就是你的样品的问题。
    你的样品比较负杂,可以看到4个组分,只不过GPC分不开。

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  • sophaloki

    第6楼2010/06/07

    可以通过调方法将他们分开吗?

    tigertooth(tigertooth) 发表:你把几次进针的图叠加比较一下,如果重现性很好,那就是你的样品的问题。
    你的样品比较负杂,可以看到4个组分,只不过GPC分不开。

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  • flyaway

    第7楼2010/06/07

    还是换柱子能分开的可能性大点

    sophaloki(sophaloki) 发表:可以通过调方法将他们分开吗?

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  • tigertooth

    第8楼2010/06/07

    换柱子也分不开,GPC的分离效果很差的。

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  • flyaway

    第9楼2010/06/07

    难道10根柱子联用会也分不开?

    tigertooth(tigertooth) 发表:换柱子也分不开,GPC的分离效果很差的。

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  • tigertooth

    第10楼2010/06/08

    首先,高分子的东西都是分子量连续的一系列样品,说白了就是宽分散,你不可能把它完全分离,比如说象一个平均分子量为45600D的样品,它的分子量最小为10000D,然后从10001D、10002D、1003D——98760D,你怎么把它分开?除非分子量差一个数量级以上,就像混合窄分布标样那样。
    其次,柱子串联多了,不能光考虑理论塔板的提高,还要考虑溶剂扩散的影响,死体积增大,溶剂扩散的效应也会使峰展宽。
    第三,GPC的分离效果差,一般GPC新柱的最高塔板也就16000,低的12000,而你实际使用上,由于系统死体积大,还要再打折扣。

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