【学习专题】每日一问（1）——HPLC流动相的调制方法

说得太笼统了，我一般先查找相关资料，然后用纯溶剂走一遍，看看保留时间情况，再细调整。缓冲盐或调PH值根据样品的性质调整。最简便的方法就是咨询一下工程师，比如色谱柱厂家的工程师，他们都比较专业。

原来遇到过一个问题：
就是ph的调节，是把水溶液调节好后再混合呢？还是混合好后再调节呢？

根据实际情况来看吧，但要统一，不能一会混合前一会混合后。

1、调整流动相中有机相和水相的比例主要是为了调整流动相的洗脱强度，是之能与固定相，待分析物质取得一定的协调。具体指标为是待分离物的所有组分的K值在0.5到20min之间。这一点对于离子型化合物和非离子型化合物都有效果，尤其是非离子型化合物。
2、流动相中的无机盐主要是起到缓冲剂的作用，当然还有作为离子对试剂的。缓冲盐的作用顾名思义就是对流动相起到pH缓冲的作用。因为有些化合物必须在某种pH条件才能够稳定。另外流动相pH控制是有效调整离子型化合物的k的有效方法。pH对样品分析很重要，稳定的pH流动相对于样品分析的重现性，耐用性很重要。为了有效控制流动相中的pH范围所以才引入了缓冲盐。一般缓冲盐的使用要注意用量、有机溶液比例等等，在选择种类的时候还要考虑最适合的缓冲范围和检测器的截至波长等因素。
至于离子对试剂。要结合分离物质性质选择，这里不赘述。

我可以很负责任地告诉你，必须要调好再做混合。我们这里讨论的pH都是指流动相中水溶液的pH值。