仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯

【求助】色谱柱封尾问题

  • huaibeijiayuan
    2010/06/27
  • 私聊

厂商论坛

  • 看了卢工讨论色谱柱粒径问题的文章,里面z版主讲到柱封尾、碳载量问题,这个在怎么理解,能详细解释一下吗?有哪些注意事项呢?
    原文如下:


    中药成份的化合物通常分子量不会太大,120A孔径的柱子应该足够了。我们选柱子的时候很少问孔径,因为分析大分子的机会并不是很多,这个时候60A80A100A120A对分离都不会有太大的影响,倒是色谱柱封尾不封尾、载碳量大不大这些考虑得更多一些,因此没有特殊说明通常我们都会默认为是、80A100A120A这种。现在做多肽的越来越多,考虑到多肽通常分子量比较大的原因,他们选柱子的时候通常首先就考虑孔径的问题。



    http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100609/2601563/index_2.shtml
  • 该帖子已被版主-月旭科技--小S加10积分,加2经验;加分理由:欢迎求助!
    +关注 私聊
  • 小卢

    第1楼2010/06/27

    柱封尾、碳载量问题也经常听到专业工程师讲,但用的少,感觉每次都没听进去。现在再来学习一下!

0
    +关注 私聊
  • plexu

    第2楼2010/06/27

    硅胶表面密布硅醇基,所谓键合和封尾都是有机硅烷试剂与硅醇基的反应。仅通过C18链等固定相键合,由于空间位阻效应,只有20-40%左右的硅醇基参与反应。封尾试剂一般为C1小分子,能与未和固定相碳链反应的残余硅醇基进一步反应。封尾的目的是为了屏蔽残余硅醇基易造成色谱峰拖尾的反应活性。
    载碳量是衡量硅胶表面键合及封尾程度的一个重要指标,固定相和封尾小分子都含碳,而硅胶颗粒原先是不含碳的。载碳量越大,说明键合封尾程度越高,硅胶表面疏水性也越强,极性越弱。

0
  • 该帖子已被版主-月旭科技--小S加10积分,加2经验;加分理由:感谢应助!
    +关注 私聊
  • 358579047

    第3楼2010/06/28

    学习了,很好的解说

    plexu(plexu) 发表:硅胶表面密布硅醇基,所谓键合和封尾都是有机硅烷试剂与硅醇基的反应。仅通过C18链等固定相键合,由于空间位阻效应,只有20-40%左右的硅醇基参与反应。封尾试剂一般为C1小分子,能与未和固定相碳链反应的残余硅醇基进一步反应。封尾的目的是为了屏蔽残余硅醇基易造成色谱峰拖尾的反应活性。
    载碳量是衡量硅胶表面键合及封尾程度的一个重要指标,固定相和封尾小分子都含碳,而硅胶颗粒原先是不含碳的。载碳量越大,说明键合封尾程度越高,硅胶表面疏水性也越强,极性越弱。

0
    +关注 私聊
  • huaibeijiayuan

    第4楼2010/06/29

    实际色谱柱选择时如何考虑这个问题呢?或者说是否关注这个指数。

    plexu(plexu) 发表:硅胶表面密布硅醇基,所谓键合和封尾都是有机硅烷试剂与硅醇基的反应。仅通过C18链等固定相键合,由于空间位阻效应,只有20-40%左右的硅醇基参与反应。封尾试剂一般为C1小分子,能与未和固定相碳链反应的残余硅醇基进一步反应。封尾的目的是为了屏蔽残余硅醇基易造成色谱峰拖尾的反应活性。
    载碳量是衡量硅胶表面键合及封尾程度的一个重要指标,固定相和封尾小分子都含碳,而硅胶颗粒原先是不含碳的。载碳量越大,说明键合封尾程度越高,硅胶表面疏水性也越强,极性越弱。

0
    +关注 私聊
  • yongw

    第5楼2010/06/29

    讲的很专业!学习了

    plexu(plexu) 发表:硅胶表面密布硅醇基,所谓键合和封尾都是有机硅烷试剂与硅醇基的反应。仅通过C18链等固定相键合,由于空间位阻效应,只有20-40%左右的硅醇基参与反应。封尾试剂一般为C1小分子,能与未和固定相碳链反应的残余硅醇基进一步反应。封尾的目的是为了屏蔽残余硅醇基易造成色谱峰拖尾的反应活性。
    载碳量是衡量硅胶表面键合及封尾程度的一个重要指标,固定相和封尾小分子都含碳,而硅胶颗粒原先是不含碳的。载碳量越大,说明键合封尾程度越高,硅胶表面疏水性也越强,极性越弱。

0
    +关注 私聊
  • zxhcnf

    第6楼2010/06/29

    载炭量的大小意味着色谱柱上键合C18的多少,载炭量越大,固定相表面的疏水性就越强,与非极性化合物间的作用力就越大,因此载炭量越大非极性化合物在色谱柱上的保留能力就越强,相同条件下,载炭量越大的色谱柱非极性化合物峰出来得越晚,在分离成分复杂样品的很多时候分离效果会好一些。封尾和不封尾对色谱行为的影响,通常硅羟基容易引起对极性化合物和碱性化合物的拖尾,因此,对带有-NHR、-NR2和NH2等容易被硅羟基影响的化合物的分析,为保持良好的峰形最好选择封尾良好的色谱柱,封尾越彻底,化合物接触硅羟基的机会就越小,拖尾就越不容易发生。而对于有些化合物极性稍大一点,在良好封尾的色谱柱上保留能力不足,需要更多一点保留时,硅羟基的极性也许是一个良好的作用位点,比封尾的色谱柱能获得更好的保留;此外,封尾试剂通常是用小分子的硅烷,这种小分子硅烷在强酸性条件下(pH<2)时因Si-C键的断裂而容易流失,造成原有色谱性能的改变和基线的不平稳,而不封尾的填料则没有这个影响,因为Si-O在强酸性(除HF外)条件下稳定性依然很好,所以在强酸性条件下分析时,为避免色谱柱很快就坏掉,最好选择没有封尾的色谱柱,我们的LP-C18就是没有封尾的,能耐到pH 1的强酸性条件。

    huaibeijiayuan(huaibeijiayuan) 发表:看了卢工讨论色谱柱粒径问题的文章,里面z版主讲到柱封尾、碳载量问题,这个在怎么理解,能详细解释一下吗?有哪些注意事项呢?
    原文如下:


    中药成份的化合物通常分子量不会太大,120A孔径的柱子应该足够了。我们选柱子的时候很少问孔径,因为分析大分子的机会并不是很多,这个时候60A80A100A120A对分离都不会有太大的影响,倒是色谱柱封尾不封尾、载碳量大不大这些考虑得更多一些,因此没有特殊说明通常我们都会默认为是、80A100A120A这种。现在做多肽的越来越多,考虑到多肽通常分子量比较大的原因,他们选柱子的时候通常首先就考虑孔径的问题。



    http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100609/2601563/index_2.shtml

0
  • 该帖子已被版主-月旭科技--小S加10积分,加2经验;加分理由:感谢应助
    +关注 私聊
  • samanthalas

    第7楼2010/06/29

    在选择色谱柱之前,如果已知待测化合物的极性较强,那么在载碳量较高的C18色谱柱上保留都会很短,导致分不开。这时就要考虑用载碳量小的或者不封尾的C18柱。
    月旭公司有几款针对极性较强化合物分离用的色谱柱,对极性化合物的保留由弱到强分别是:
    AQ-C18, XB-CN, LP-C18
    他们的载碳量分别是12%,7%,10%(不封尾)

    huaibeijiayuan(huaibeijiayuan) 发表:实际色谱柱选择时如何考虑这个问题呢?或者说是否关注这个指数。

0
    +关注 私聊
  • huaibeijiayuan

    第8楼2010/06/29

    谢谢专业解答

0
    +关注 私聊
  • 可爱宝贝

    第9楼2010/06/29

    学到新的知识,谢谢

0
    +关注 私聊
  • 小卢

    第10楼2010/06/30

    AQ和LP有什么区别?

    samanthalas(samanthalas) 发表:在选择色谱柱之前,如果已知待测化合物的极性较强,那么在载碳量较高的C18色谱柱上保留都会很短,导致分不开。这时就要考虑用载碳量小的或者不封尾的C18柱。
    月旭公司有几款针对极性较强化合物分离用的色谱柱,对极性化合物的保留由弱到强分别是:
    AQ-C18, XB-CN, LP-C18
    他们的载碳量分别是12%,7%,10%(不封尾)

0
查看更多
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
举报帖子

执行举报

点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...