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【原创】【极限体验】之有机酸不同色谱柱比较

  • huaibeijiayuan
    2010/06/27
  • 私聊

厂商论坛

  • 最近因为需要进行一个项目转移,送来了一些样品进行验证,因为方法之前就有,这次只需要进行对方法进行确认就可。因而初期认为工作量比较少,谁想为了优化条件而大费了周折。先把样品情况介绍一下:样品为一个有机酸,固体样品,生产过程控制样品。不说这么多了,先上一张样品照片。

    是不是有点像传说中的白粉,呵呵
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  • huaibeijiayuan

    第1楼2010/06/27

    分析方法也是比较简单的:(但要声明一点,此次的试验只是从更换色谱柱来考虑不同色谱主对样品的检测的适应性,没有考虑到调整流动相的比例,当然后期会考虑更进一步对此分析方法进行优化。)

    流动相:甲醇:水:磷酸=65:35:0.1

    柱温:25

    检测器:UV,波长220nm

    流速:1.0ml/min

    分析时间:50min

    色谱柱柱:C18, 150mm*4.6mm*5um

    样品处理:称取0.03g样品溶解于40ml甲醇中,超声过滤,备用。

    以下是分析谱图:


    可以看出在主峰的后面有一个杂峰未能完全分离,并且杂质也没有分开,将谱图放大,看的比较清楚。当时仪器运行时的泵压为126帕,

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  • huaibeijiayuan

    第2楼2010/06/27

    可能有人会问,从谱图上看10min之后就没有组分流出,为什么要运行这么长时间呢?其实当时是随即拿了一个样品,刚好这个样品后面没有其他组分了,有的样品在接近40分钟时还有组分流出,所以当时定了运行50min



    刚好手边有一根重新处理过的备用的月旭色谱柱,临时拿过来试试吧。分析条件不变,但泵压达到了182bar,用得是250mm的色谱柱。从谱图上看,主峰和杂峰能达到明显的分离,同时保留时间也明显的推迟了。
    放大后的谱图

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  • huaibeijiayuan

    第3楼2010/06/27

    因为手边没有月旭的150mm色谱柱,所以调整了流动相的PH值,检测结果是组分稍微前移,但后杂有了明显的显现。









    可喜的是,上周与月旭公司联系,申请了一根150mm色谱柱的试用,月旭公司同意并邮寄了一根150的色谱柱,昨天收到了,准备最近用150mm的柱子试试看。
    到时请看后续调试结果。

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  • 小卢

    第4楼2010/06/28

    很不错的作品啊!
    我想问一个问题:如果方法研究时开始用的是一个型号的色谱柱,那么更换其他型号的色谱柱需不需要做个转移呢?或者证明性的材料呢?

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  • 小卢

    第5楼2010/06/28

    重新处理过的备用的色谱柱是啥意思啊?新柱还是旧柱啊?

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  • huaibeijiayuan

    第6楼2010/06/28

    以前购买的色谱柱,寄到月旭公司重新处理的

    小卢(luxw) 发表:重新处理过的备用的色谱柱是啥意思啊?新柱还是旧柱啊?

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  • plexu

    第7楼2010/06/28

    既然用4.6x250mm的柱子取得了好的色谱分离效果(与杂质基线分离),且保留时间在15分钟以内,不算太长,没必要一定要换15厘米短柱吧。如果一定非要缩短保留时间又能保持分离度,最多试一下4.6x200mm规格的柱子。

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  • figoandshanshan

    第8楼2010/06/28

    感觉像是为XX做广告的,呵呵

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  • xtoridt

    第9楼2010/06/28

    220nm快到甲醇截止波长了,该考虑用乙腈了

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  • huaibeijiayuan

    第10楼2010/06/29

    主要考虑后面的杂质,不然分析时间太长了

    plexu(plexu) 发表:既然用4.6x250mm的柱子取得了好的色谱分离效果(与杂质基线分离),且保留时间在15分钟以内,不算太长,没必要一定要换15厘米短柱吧。如果一定非要缩短保留时间又能保持分离度,最多试一下4.6x200mm规格的柱子。

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