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LCMSMS测定食品中氯霉素含量测量不确定度评估
zhengweifall
第1楼2010/07/19
4 计算公式和数学模型
食品中氯霉素的含量按下述公式计算
X—样品中氯霉素的含量,μg/kg
C—样品最终测定的浓度,μg/kg
V—旋转浓缩至干后溶解用水的体积, 5ml
m—称取试料的质量,10g
Rec—与样品同时做三个添加回收实验,三个回收样的平均回收率。
上述公式是从测定原理给出的。显然没有考虑各种随机因素对不确定度的影响,再次应引入反映各方面随机影响的重复性系数 ,其数值等于1。
评定不确定度的数学模型应写成如下形式:
5 食品中氯霉素含量测量不确定度的来源
6 各分量标准不确定度的评估
6.1测量重复性标准不确定度
本测量分三组观测了6份数据,所得结果如下表所示:
多次测量的实验标准偏差按下式计算
其中m=3 Sj为每组数值的标准偏差,计算得到Sp=0.15 μg/kg
在日常分析中,测量两份样品,报告平均值。两次测量结果的平均值的相对标准偏差为:
6.2 精制浓缩液定容后试验液浓度的标准不确定度
6.2.1由标准曲线引起的不确定度
标准曲线取5个浓度点,每个浓度点进样1次,结果如下:
标准曲线的方程为:y=14100c-5300
试验液的浓度通过拟和标准曲线确定,由标准曲线引入的标准不确定度按下式计算:
其中,p—试样平行测定次数
n—拟和直线的数据对总数
y—试样测量响应值(p个)的平均值
—绘制拟和直线响应值(n个)的平均值
—绘制拟和直线输入值
—绘制拟和直线输入值的平均值。
Cp—试样测量预估值
在本测量中,p=1, n=5,试样测量响应值y1=5690,利用拟和标准曲线计算得到试验液的浓度Cp=0.78 μg/kg。把相关数据带入上述公式计算得到由标准曲线引入的标准不确定度:S(Cp)=0.126 μg/kg。其相对标准不确定度为
6.2.2 配制标准溶液浓度的不确定度
6.2.2.1 标准溶液的配制方法
1000μg/ml标准原液
标准原液:使用分析天平(精确至0.1mg)正确称量10.0mg(+0.2mg)(w)氯霉素标准品(纯度p为99%)于10ml容量瓶中,用甲醇溶解,定容至10ml(L1)。
标准溶液1(100ppm):准确吸取标准原液1ml(l1)于10ml(L2)容量瓶中,用甲醇定容。
标准溶液2(10ppm):准确吸取标准溶液1 1ml (l2)于10ml(L3)容量瓶中,用甲醇定容。
标准溶液3(1ppm):准确吸取标准溶液2 1ml(l3)于10ml(L4)容量瓶中,用甲醇定容。
标准溶液1、2、3 于-20℃冷冻保存。可使用6个月。
标准曲线用标准溶液:准确称取标准溶液3(1ppm)1ml于10ml(L5)容量瓶中,用水定容至10ml(L1),配制成100ppb(l4)标准溶液。然后依次用水递减稀释配制成氯霉素浓度分别为10ppb,5ppb, 2ppb,1ppb,0.5ppb。
6.2.2.2 计算公式
6.2.2.3各分量不确定度评估
(1)标准品质量w
标准品质量的不确定度有天平的校准和称量的误差引起。根据天平说明书,天平的线性允差为±0.2mg,由天平校准引起的标准不确定度为。
规定称量的误差为±0.2mg,由称量误差引入的标准不确定度为:
(2)纯度p
供应商在证书上给出的标准品的纯度为99%。由于没有不确定数值的其他信息,假设是矩形分布。标准不确定度u(p)为
(3)1ml移液管l
1ml移液管使用单标移液管,制造商提供的移液管在20℃的容量允差为±0.007ml,假设为三角形分布,移液管体积的相对不确定度为
(4)10ml容量瓶L
制造商提供的10ml的容量瓶在20℃的容量允差为±0.025ml,假设为三角形分布,容量瓶体积的相对不确定度为
综合以上各不确定度分量,调制标准曲线用标准溶液的不确定度为
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第2楼2010/07/19
6.2.3温度的变动引起的标准溶液浓度的标准不确定度
氯霉素溶液的浓度是在20℃条件下配制的,实验室温度变化介于±5℃,甲醇的体积膨胀系数为1.19×10-3/℃ ,假定为均匀分布,由温度的变动引起的标准溶液浓度的相对标准不确定为
精制浓缩液定容后试验液浓度的标准不确定度由上述三项分量合成,
6.3试料质量m的标准不确定度
试料质量的不确定度有天平的校准和称量的误差引起。根据天平说明书,天平的线性允差为±0.02g,由天平校准引起的相对标准不确定度为。
规定称量的误差为±0.05g,由称量误差引入的相对标准不确定度为:
6.4体积V的标准不确定度
V :浓缩至干后溶解用水的体积, 5ml,使用5ml刻度移液管量取,制造商提供的5ml刻度移液管的允许误差为±0.025ml,假定为三角形分布,标准不确定度为: ;读数的误差为±0.05ml,假定为矩形分布,标准不确定度为: ,因此,V的标准不确定度为,V的相对标准不确定度为 。
6.5 回收率Rec的标准不确定度
收集了三组回收率的数据,具体结果如下表。
多次测量的实验标准偏差按下式计算
其中m=3 Sj为每组数值的标准偏差,计算得到Sp=0.12 μg/kg,Sp的自由度为vp=m(n-1)=6
标准偏差采用平均值的标准偏差。
7 合成标准不确定度
样品中氯霉素的含量X的计算公式如下
基于该计算公式及上述各分量不确定的分析,样品中氯霉素的含量X的合成标准不确定度为:
8 扩展不确定度
取包含因子k=2,置信水平为95%,扩展不确定度为:
9 报告不确定度
用LCMSMS检测食品中氯霉素的含量,测量2个样品,取其平均值报告结果,平均值的扩展不确定度U(X)=0.24μg/kg,包含因子k=2。