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【求助】硫酸软骨素含量测定

液相色谱(LC)

  • 大家好,请教!
    硫酸软骨素含量测定按照2010年版药典,用酶解法HPLC测定。使用硫酸软骨素ABC酶。请问大家使用的是哪个厂家的酶?
    我看很多文献使用的是sigma的产品。但我发现sigma的产品是冻干粉末,是以硫酸软骨素C为底物冻(支撑剂)干的。这样的话,酶里面就含硫酸软骨素了,我认为会对测定产生干扰。
    不知道大家用的什么产品?
    谢谢
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  • lfenghx

    第1楼2010/07/21

    即使对照品也是使用此酶进行酶解,看起来可以抵消干扰,但从理论上来说,还是不太合适吧,测定不是很准确。在进行方法写验证时,线性试验和回收率试验很难合格吧

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  • 老多_小多

    第2楼2010/07/22

    GB/T 20365-2006 硫酸软骨素和盐酸氨基葡萄糖含量的测定 液相色谱
    这个方法到是做过

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  • 有水有渝

    第3楼2010/07/22

    应助达人

    问过中国药品生物制品检定所没有这个酶吗?

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  • 牛牛

    第4楼2010/07/22

    我们用的就是sigam的标准品做酶解色谱,倒是没考虑过这个干扰,一直用了很久了。

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  • lfenghx

    第5楼2010/07/22

    呵呵,谢谢大家回复和指点。
    不知道是不是我英文水平太差了,把这个意思理解错了
    Chondroitinase ABC from Proteus vulgaris
    lyophilized powder, 0.3-3 units/mg solid (using chondroitin sulfate C as substrate)
    我理解为:以硫酸软骨素C为底物(支撑剂)的冻干粉末。看来是我理解错了,这个破英文水平真害人,我找了一天这个酶。

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  • lfenghx

    第6楼2010/07/22

    我还请教一下我楼上的“牛牛”。
    你们做这个的时候是用的哪个厂家的色谱柱啊?药典上推荐Hypersil SAX阴离子交换色谱柱,我查了下,目前有国产的大连依利特Hypersil SAX色谱柱,只要1300一根,有原装进口的Hypersil SAX色谱柱药2200以上一根。
    请问您用的哪个厂家的呢?效果怎么样啊。
    还有就是测这个有什么注意的没有啊?
    三羟甲基氨基甲烷和三水乙酸钠只要AR级别的就行了吧?
    谢谢您

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  • wsdh1981

    第7楼2010/08/04

    请教一下牛牛,你用的是2010版中国药典的方法,使用的是什么型号的液相

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