液相色谱（LC）
tigertooth
第1楼2010/07/23
要用水相的GPC柱，如TSK的SW系列柱或SHODEX的KW系列柱，GPC软件
有水有渝
第2楼2010/07/23
补充：有了色谱柱，还要有示差折光检测器。楼主说明一下检测器的型号。
liminzhe
第3楼2010/07/29
我推荐GE的Superdex 75 5/150的柱子，设定柱温25°，接在HPLC上后，用含25 mM的磷酸盐，200 mM的NaCl，pH 7的缓冲液做流动相，平衡3-5个柱体积至紫外和压力基线稳定，先后进样标准品和样品，得到各自的保留体积。对标准蛋白的分子量求对数，与保留体积进行一次线性回归得到方程，再代入待测样品的保留体积求得其分子量的对数，再求反对数即得。注：buffer的pH应远离目标蛋白的PI2个单位，防止沉淀
jiachenzhong
第4楼2010/09/23
请问标准品选择什么较好
第5楼2010/09/23
蛋白一般有紫外吸收，而且样品往往浓度低或量很少，所以还是紫外检测器更好。
Vigorous
第6楼2010/09/24
我一般用TSK2000加PDA检测器，缓冲液pH6.8
ahuadicp
第7楼2010/09/24
分子量测定一般用GPC凝胶过滤色谱，系统跟液相是一样的，只是采用的柱子是凝胶柱，流动相为缓冲盐。检测器的话我们用过折光示差
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