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【原创】对LC的认识(4)

厂商论坛

  • 看了论坛上大家写了不少原创性的文章,都是自己在实际工作中的经验,这对我们大家来说都是很宝贵的财富,不过我觉得这些文章中存在着一些问题,想跟大家探讨下,希望大家指正。
    首先:关于精密度测定的问题。很多人都是取某一个样品连续进5针,算出RSD,这本是没错,但把它写在文章中就不合理了,因为这么做仅仅是对仪器本身的精密度作了考察,不能反映样品的任何问题。即使要写在论文中,那么应该这样做,配置5份平行样品,进样分析算RSD,这对于样品来说才是有意义的。
    其次:关于加标回收率的测定。加标浓度的选择不是随意的,一般加标浓度是实际样品浓度的0.5-2倍,这个大家要注意,加标低浓度和高浓度都要做,因为这反映了不同的问题。一个是看低浓度时样品损失如何,准确度如何;一个是针对高浓度而言。
    第三:关于论坛上争论比较大的“反冲或者不反冲的问题”。这个按照我做实验的实际情况是:反冲柱子确实会损失一部分柱效,但不是很明显,反冲最大的问题是:即使反冲成功了柱子仍然是用不了多久,这样即使再怎么反冲柱子还是会报废,但反冲确实不失为解决柱压问题的方法。
    第四:关于大家讨论关于做色谱质谱“理论还是实践?”的问题;我个人认为,通过做了这么久的LC-MS,一些基本的操作,维护仪器我大体上了解了,实践是很重要,但也绝不能忽视理论知识的学习。如果你只满足于操作、做出结果,而不去思考问题,那么跟个操作机器人没什么两样。说实话像现在的仪器越来越傻瓜化了。举个很简单的例子,谁敢说自己把“梯度洗脱、流动相的优化”完全吃透了?恐怕大多数人还是比较模糊吧。有时我们看到一个实验手段、方法,就要去质疑它,看看能不能找到更好的解决手段。所以思维、创新才最重要。

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  • 〓猪哥哥〓

    第1楼2010/10/06

    不整一个原创作品?

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  • xue2009

    第2楼2010/10/06

    不了呵呵,主要是觉得作为版主,应该把自己的一些肤浅的认识写出来,让大家指正,共同学习。

    〓猪哥哥〓(03yx2) 发表:不整一个原创作品?

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  • 雪妖

    第3楼2010/10/06

    有个问题请教一下

    首先:关于精密度测定的问题。很多人都是取某一个样品连续进5针,算出RSD,这本是没错,但把它写在文章中就不合理了,因为这么做仅仅是对仪器本身的精密度作了考察,不能反映样品的任何问题。即使要写在论文中,那么应该这样做,配置5份平行样品,进样分析算RSD,这对于样品来说才是有意义的。

    是同时处理5份样品溶液吗?
    以前在做仿制药的申报时,有一个步骤是,同时处理6份样品,计算其含量结果,这个结果计算RSD,这叫重复性;
    不知道喝楼主的有什么不一样

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  • 青林

    第4楼2010/10/06

    反冲确实感觉用处不大

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  • xue2009

    第5楼2010/10/06

    你说处理6个样品可能是按照你参考的标准来的,我想表达的意思是不能用一个样品进多针测RSD。

    雪妖(czj_1027) 发表:有个问题请教一下

    首先:关于精密度测定的问题。很多人都是取某一个样品连续进5针,算出RSD,这本是没错,但把它写在文章中就不合理了,因为这么做仅仅是对仪器本身的精密度作了考察,不能反映样品的任何问题。即使要写在论文中,那么应该这样做,配置5份平行样品,进样分析算RSD,这对于样品来说才是有意义的。

    是同时处理5份样品溶液吗?
    以前在做仿制药的申报时,有一个步骤是,同时处理6份样品,计算其含量结果,这个结果计算RSD,这叫重复性;
    不知道喝楼主的有什么不一样

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  • 神话

    第6楼2010/10/06

    大家说的RSD是不是系统适用性,一个样品多针的确和样品没关系

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  • xue2009

    第7楼2010/10/06

    系统适应性不要写在论文里,没有任何意义。

    神话(fcqxqyslzx) 发表:大家说的RSD是不是系统适用性,一个样品多针的确和样品没关系

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  • 雪妖

    第8楼2010/10/06

    做这个精密度是用同一份标准品进样,不是用样品溶液,我回头翻翻药典,家里没有,公司有

    xue2009(xue2009) 发表:你说处理6个样品可能是按照你参考的标准来的,我想表达的意思是不能用一个样品进多针测RSD。

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  • 神话

    第9楼2010/10/07

    现在的论文可信的太少,也不知道那些审稿的都啥水平。时间长了你看我我看你,太有意思了,呵呵

    xue2009(xue2009) 发表:系统适应性不要写在论文里,没有任何意义。

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  • fanlx1122

    第10楼2010/10/07

    RSD 是系统适用性的一个指标。 系统适用性通常还有Retention Time, Peak Shape 等等。 系统适用性所用的样品是参照样品(ReferenceSample). 进样后计算相对偏差(%RSD)。 重复性(RSD)是用真实的样品进行测量, 然后计算6次测量的相对偏差(%RSD)。因此来衡量的精确度。

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