【求助】柱子用上一段时间后标样就拖尾

1、楼主所用流动相组成是什么？
2、柱子冲洗不能一下子就用纯甲醇，应该若为缓冲盐流动相，先用水冲洗，再用5%——10%甲醇冲洗一段时间再换纯甲醇冲洗。

流动相是甲醇：水=77：23，样品是胡椒碱

样品走完后，先用流动相冲洗一段时间，再慢慢过度到纯甲醇冲洗。

或者用95%的水冲洗，再用95%甲醇冲洗，最后用纯甲醇冲洗试试。

每次做完样品楼主都是怎么冲洗柱子的？

做完就用纯甲醇冲洗的，时间大约是20分钟到40分钟不等

像不像是样品发生变化了呢

用5%甲醇水和95%的甲醇水各清洗1h后，峰好像变化了一下，主峰保留时间差不多。下一步还要接着清洗吗？

流动相的比例是不是得调整一下啊？一是柱效能不好，二十分不开，缓冲盐用10%的甲醇冲洗20min就行。