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【原创】对LC的认识(10)

厂商论坛

  • 今天继续跟大家交流我对LC的认识。大家知道样品前处理是很重要的一个过程,甚至比分析更重要,分析的程序可以按部就班的进行。下面讲下一些前处理的方法和经验;
    固相萃取是一种比较好的萃取方式,它的作用是除去杂质和富集目标物,一般常用的固相萃取柱有C18柱,C18-/OH柱,阴离子交换柱,阳离子交换柱等等。C18柱也就是纯粹的反相保留机制,阴离子交换和阳离子交换保留机制依据形成离子缔合物,根据疏水效应得以保留。使用阴离子或阳离子交换柱最重要的有两点,这里我们以阳离子交换柱为例,第一点要注意的是将样品的PH值调节至酸性(PH值应小于其PKA值两个单位以上),目的是为了让目标物结合质子带上正电荷,以便和树脂上阳离子交换得以保留,第二点要注意的是洗脱是注意用大于样品PH值两个单位的溶剂洗脱,以便中和样品所带的正电荷。明白了这两点后其它的都不是问题。
    使用
    大孔树脂先做预分离也是一个很好的前处理方式,它可以大大降低在进行LC分析时的基质效应,一般我们用湿法填柱,大家在填柱的时候遇到最大的问题可能是气泡难于排出。我们可以这样做,先往柱子里加半管水,然后把头大孔树脂加入进去,慢慢的把水排掉,利用排除水时可以不断的把气泡排尽,这真的是个好方法,大家在装柱的时候不妨运用下。像我在实验室做天然产物的预分离,AB-8大孔树脂用的最多,它是一种弱极性的填料,对于分离一些黄酮类化合物非常有帮助。
    所以大家在做样品的前处理是可以根据样品的极性,疏水性,PKA值等等充分的利用这些前处理方法,做到心中有数。
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  • 雪妖

    第1楼2010/10/12

    请问一下,那碱性物质是不是就是将样品的PH值调节至减性(PH值应大于其PKA值两个单位以上)?
    根据原理就是这样的咯

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  • xue2009

    第2楼2010/10/12

    你说的应该是酸性物质

    雪妖(czj_1027) 发表:请问一下,那碱性物质是不是就是将样品的PH值调节至减性(PH值应大于其PKA值两个单位以上)?
    根据原理就是这样的咯

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  • 小鸟飞翔

    第3楼2010/10/13

    先往柱子里加半管水,然后把头大孔树脂加入进去,慢慢的把水排掉,利用排除水时可以不断的把气泡排尽,

    这个经验不错

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    第4楼2010/10/13

    大孔的话,其实气泡如果挺多,可以搅一搅就好了~
    不影响后面的分离的,他其实就是一个粗分,一个前处理手段~

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    第5楼2010/10/13

    另外,问一下,前一段时间看到的一个争议~

    D101跟AB-8到底是不是一个东西~
    有人说,是一个东西~
    有人说这样的关系:都是C18,一个是月旭的,一个是岛津的,呵呵~

    不知道楼主了解不了解?

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  • ruby70303

    第6楼2010/10/13

    D101和AB-8不是大孔吗?怎么和C18有关系呢?

    环烯醚萜(kaikaifeng) 发表:另外,问一下,前一段时间看到的一个争议~

    D101跟AB-8到底是不是一个东西~
    有人说,是一个东西~
    有人说这样的关系:都是C18,一个是月旭的,一个是岛津的,呵呵~

    不知道楼主了解不了解?

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  • 雪妖

    第7楼2010/10/13

    哈哈,打了个比喻,也就是说是一个东西,只是不同的品牌

    ruby70303(ruby70303) 发表:D101和AB-8不是大孔吗?怎么和C18有关系呢?

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  • 雪妖

    第8楼2010/10/13

    哈哈,对的,弄反了,我说的这个是在C18上的分离咯

    xue2009(xue2009) 发表:你说的应该是酸性物质

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    第9楼2010/10/13

    这位板友啊,我对你的这种理解,很是无奈,汗~
    我头疼,我伤脑筋~

    ruby70303(ruby70303) 发表:D101和AB-8不是大孔吗?怎么和C18有关系呢?

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    第10楼2010/10/13

    看来,知我者,莫雪版主啊,呵呵~
    雪版主了解么?

    雪妖(czj_1027) 发表:哈哈,打了个比喻,也就是说是一个东西,只是不同的品牌

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