仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯
立即体验
APP内打开
回版面
2
收藏
点赞
拍砖
举报
取消
发布
当前位置:
仪器社区
>
色谱
>
离子色谱(IC)
>
帖子详情
【讨论】有关DNA片段的分析方法 (求达人)
zl2008boy
2010/10/27
私聊
离子色谱(IC)
我的一个朋友学生物的,最近正发愁如何对DNA片段进行
液相
分析。问了下,DNA片段是人工合成的,所以基体并不复杂,目的是通过对目标物的测定,表征之前的生物过程效果(内切什么的),分子量3000左右。我问了下他现在怎么做的,回答流动相是三乙胺醋酸盐、乙腈。由于自己对生物学方面知识薄弱(早已忘记了DNA分子化学结构为何、有何基团),没有提出意见。
回来查了一下。首先看到的是Transgenomic公司wave商品名的DNA分离分析系统。看了下介绍,原来所谓的“分子桥”就是离子对色谱法。对于阴离子(磷酸基团PKA1为1-2)的核酸片段,通过加入三乙基胺醋酸盐,与之形成离子对,通过三乙基胺的疏水性与C18作用,形成保留,然后用乙腈洗脱,似乎没什么专利的内容。后来发现,关键在于那根特别的C18链的DNA分析柱,“无孔多苯乙烯-二乙烯基苯 (PS-DVB)共聚物微球(3微米)与C18形成稳定的固相”。
疑问1:这种非硅胶基质的C18柱有何神奇之处?硅胶基质的C18为能不能做(估计不能,要不就不是专利了)?(硅胶表面的硅羟基会不会和DNA有什么反应)
疑问2:有孔与无孔,对于这种大分子有何不同?孔径方面要选多大的,120A的会堵柱子么?
疑问3:wave仪器的柱温为50-80度之间,分别应对非变性,部分和全部变性。这里的变性为何?一般柱温箱和C18的柱子柱温上限为多少?(我印象中柱温箱好像就是50度)
文献方面,看到一些用强阴离子交换(SAX)做的。tris-HCl缓冲系统,pH控制在9。此时DNA片段挂在SAX柱上。然后通过NaCl梯度淋洗(Cl-竞争阴离子?),洗脱下DNA分子片断。
疑问1:SAX柱怎么使用和维护?需要注意什么?硅胶基质的和聚合物基质相比除了pH耐受性外有何不同?
疑问2:为何选用NaCl淋洗?淋洗完后,挂在柱上的季胺上的Cl-怎么办?
疑问3:此方法与那个wave相比,优点和缺点为何?
其实疑问有很多,就不一一列出了,希望有经验的前辈多多发言,不吝赐教,小生感激涕零。
分
该帖子已被
版主-月旭科技-雪妖
加10积分,加2经验;加分理由:很有深度的讨论
相关话题
1
【求助】光谱色谱仪器的疑问
2
【求助】DNA片段分析,求专家。
3
【讨论】关于前处理的Ag柱,Na柱
4
【求助】请教:柱子检测 流动相问题?
5
【原创】关于抑制器的疑问
+关注
私聊
zl2008boy
第1楼
2010/10/27
啊,神啊。我在线等啊。
0
发表回复
+关注
私聊
快乐
第2楼
2010/10/28
应助达人
这个不懂,最好发到
离子色谱
版,会有专家给你解答。
0
发表回复
近期热榜
赛默飞实验室产品焕新计划有奖调研!
【七月征文】不一YOUNG实验“猿”
报名开启:ICS2024第十三届光谱网络会议!
推荐收藏!盘点中药材及饮片检测解决方案
热门活动
甄选国优仪器,助推设备更新
采购咨询618活动:1000元奖励等你拿
猜你喜欢
最新推荐
热门推荐
更多推荐
【讨论】关于液相离子色谱的高压平流泵
2012/03/24
【分享】《有机化学实验技术.PDF》
2006/10/12
瑞士万通离子色谱 基线走不平怎么办?请各位高手不吝指教。。。
求助
2013/07/19
离子色谱法测溴酸钾中Ag/H柱如何使用?
求助
2016/07/06
【讨论】抑制器中有气泡会不会影响分析结果,又应该如何处理?
2008/11/06
用AS24检测水中氯酸盐、亚氯酸盐、溴酸盐不出峰
求助
2012/08/07
【求助】关于离子分析色谱的求助
2008/09/26
【讨论】昨天我们的戴安离子色谱:检测器堵了?!
2009/11/03
离子色谱峰分叉
原创
2024/07/03
赛默飞离子色谱 空白水出倒峰
悬赏帖
2024/07/01
赛默飞离子色谱 空白样品氯离子出倒峰请问该怎么解决
原创
2024/07/01
直读式光谱仪与EDS哪个好
分享
2024/07/01
操作建议
原创
2024/06/29
6段8位高稳定数码管驱动/点阵LED驱动芯片VK16K33A数码管控制电路
求助
2024/06/26
永嘉原厂14*4段 LCD液晶屏驱动IC-VK1S56D SSOP24 0.635脚距省电模式,FAE技术支持
分享
2024/06/26
TOADKK离子色谱仪ICA-7000优缺点
原创
2024/05/20
检测报告一定要有判定结果吗?
求助
2024/07/01
气相FID重现性不好原因
求助
2024/07/01
求助,非甲烷总烃测定中,除烃空气0.4mg/m3,怎么计算的呢?是按总烃计算公式吗?
已应助
2024/06/29
求助安捷伦GC7890B,EPC无响应解决办法
求助
2024/07/01
HJ1332便携非甲实际应用问题
讨论
2024/07/01
衍射斑点标定求助
已应助
2024/06/30
EI源的灯丝镉厂家通用吗?
求助
2024/07/03
‘有奖问答’对错题’:用抽样方案(30,0)对产品批进行连续验收,当批不合格品率为1%时,方案的接收概率为73.97%,则平均检出质量为( )。
讨论
2024/07/05
【讨论】矿泉水指标“半峰宽”是怎么做的?
2010/10/27
举报帖子“【原创】常参加实验室比对的朋友可以加入这个圈子”
2010/10/27
举报帖子“【讨论】XRF 仪器 == 告诉你一个真实的内容 ==”
2010/10/27
【分享】降雨预期补充阿根廷玉米和大豆种植区的土壤水分
2010/10/27
【分享】论企业的情绪管理
2010/10/27
【原创】捐赠助学基金为什么看不到积分增减记录
2010/10/27
【求助】高效液相结果图能否修改???
2010/10/27
【求助】做了高液相色谱,怎样导出结果图
2010/10/27
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器(上海)有限公司(PerkinElmer)
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁
举报帖子
执行举报
点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...