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【分享】一个难溶的蛋白质

tianru的爸爸

2010/11/05

生命科学仪器综合讨论

最近在做一个蛋白质的纯化，实在是太难溶了。
包涵体表达的，用8M尿素溶解都只能溶解到1-2mg/ml，去掉尿素用其它去污剂（Triton，Tween）就析出，实在太费劲了。

又不能用SDS，这个实在太难去除了，因为它（SDS）会影响后续实验。

等我把它真正溶解后再说说用的是什么溶剂配方。

如果大家也有类似的经历，可以一起来分享分享。

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省部重点实验室

第1楼2010/11/06

你可以下载一下包涵体相关的论文

参考他人的劳动成果学习一下 O(∩_∩)O哈！

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tianru的爸爸

第2楼2010/11/08

今天用ph5.0的buffer上SP柱，ph6.4和7.4的清洗，精氨酸洗脱。
基本缓冲液成分：10%甘油、5mM EDTA、0.5%Triton X-100、5mM DTT。

现在正在电泳，结果明天出来。

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