维权声明:本文为sunpengwjh原创作品,本作者与仪器信息网是该作品合法使用者,该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为,我们将追究法律责任。
毛细管电泳电流中断原因分析
图1 毛细管电泳仪示意图
sunpengwjh
第1楼2010/12/01
可能导致断流的原因:
1、毛细管电泳柱子
1.1柱子断裂
毛细管柱子外壁涂有聚亚酰胺涂层,有很好的韧性,一段这层涂层脱落,毛细管柱子将失去原有的韧性,变得很脆,很容易折断。取毛细管柱子时千万不要用利器划柱子,否则柱子很容易在划痕处断开。毛细管柱子断裂后,缓冲溶液从断裂处流出色谱柱子,进而不能构成回路,从而导致电流迅速下降,致使电流中断,分离分析中断。
解决方法:更换柱子(平时更换柱子特别注意,不要用利器划到柱子)
图2 断了柱子的毛细管电泳示意图
图3柱子被堵后毛细管电泳示意图
sunpengwjh
第2楼2010/12/01
2、气泡问题
2.1缓冲溶液中的气泡
我们在配置缓冲溶液时,所选用的水及在配置的过程中会使缓冲溶液溶解少量的气体,当这部分缓冲溶液进入到毛细管柱子内部时,两端加高压,运行一段时间会是缓冲溶液中的气体溢出,使柱子内产生气泡,从而使电流中断。
解决方法:缓冲溶液配置后进行脱气处理
2.2运行中的气泡
毛细管电泳因为在高压的前提下运行,所以柱子内产生大量的焦耳热,致使柱子内产生运行的气泡,随着分离时间的进行气泡会越来越多,最后致使柱子断流,从而使电流中断。
解决方法:选择与实验合适的分离电压和柱温
3、样品问题
刚开始接触电泳的学者,往往没有注意到溶解样品的缓冲溶液会对实验结果会造成很大的影响,有的时候甚至用一些不能产生电渗流的有机溶剂来溶解样品,如果近样量非常的大,导致柱子内很长的一段不能形成回路,最终使电离中断,无法进行实验。
解决方法:用合适的缓冲溶液来溶解样品。
图4进样后毛细管电泳示意图
奖品许愿:打印机