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【分享】液相色谱中一个容易忽略的溶剂效应！

省部重点实验室

2010/12/18

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p]液相色谱[/url]中追求一个高柱效，高分离是我们做液相色谱追求的目标，但是往往存在很多问题，比如：柱效，分离，拖尾，峰展宽，峰变形，裂缝等等，有些容易解决，有些尝试很多途径都无法改善，当然可能会是方法本身的原因，但是也存在一些忽略的问题：比如本文中提到的溶剂效应，举二例说明：

　　(1)盐酸小檗碱，方法见三黄片补充方法，左图为调整方法前液相色谱图，峰严重变形，我的做法是调大有机相比例，减小进样量，结果出来右边的图

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2010-6-23 23:35

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　　(2)阿莫西林，方法见中国药典二部，左两图为失败方法，右图为调整溶剂的图：需要说明的是我们的是多元泵，也就是作为溶剂的流动相为量筒配置，试验过程中调整了上机的流动相(有机相减少)，而作为溶剂的未调。我的做法是将溶剂的流动相调比例至比上机流动相低5个比例。结果见右图。

　　

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　　原因，第一例溶剂为甲醇，流动相为乙腈与离子对混合液，第二例溶剂有机相比例比流动相高，共同点为溶剂强度比流动相强。

　　解析：液相色谱一般进样量为10微升，柱子中局部流动相量比较小(没具体算)，当样品溶液进入柱子，10微升体积会改变局部的流动相环境(强度)，从而可能出现两种保留行为，反应在图谱上就是变形，如拖尾，裂缝，肩峰。

　　希望对做液相色谱的朋友有用。

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helo

第1楼2010/12/19

还真遇到过应该注意一下

0

神话

第2楼2010/12/19

那么改变样品的进样量呢？比如原本20微升的改为5

0

yuduoling

第3楼2010/12/28

有用有用，多谢分享了

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