【分享】博纳艾杰尔提供瘦肉精检测方法！

博纳艾杰尔

2011/03/15

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瘦肉精”能使猪提高生长速度，增加瘦肉率，猪毛色红润光亮，收腹，卖相好，但是人食用后会出现头晕，乏力等症状，原有心律失常的患者更容易发生反应，心动过速，恶化病情。
早在2002年，国家农业部，卫生部就发布标准，严禁在饲料中添加瘦肉精。但时至今日，各地对瘦肉精的检测并不严格。
博纳艾杰尔提供瘦肉精的检测方法，具体为：

实验材料

1.1 固相萃取小柱：Cleanert PCX(150mg/6mL)

1.2 四种β-激动剂药物：盐酸克仑特罗、沙丁胺醇、西马特罗、莱克多巴胺等4种β-激动剂药物。

2. 试料的制备

准确称取已绞碎的组织样品10g，于50mL具塞离心管中。加入20mmol/L的乙酸铵缓冲溶液20mL，均质5min。加入50uL β-盐酸葡萄糖醛甙酶溶液，摇匀、超声15min，于37℃酶解18h。于3000r/min离心5min，过滤上清液，收集滤液。

3. 净化

依次用甲醇5mL、水5mL和30mmol/L盐酸5mL润洗固相萃取小柱，将上述备用液过柱，依次用水5mL、甲醇5mL淋洗，真空抽干，用4%氨化甲醇5mL洗脱PCX小柱，收集洗脱液于具塞玻璃试管中，50℃下氮气吹干。在样液过柱和洗脱过程中流速控制在1mL/min左右。

4. 衍生化及检测

将上述盛有残渣的具塞玻璃试管放入50℃烘箱中加热片刻，除去水分后，加入甲苯100mL和双三甲基硅基三氟乙酰胺（BSTFA）100mL，涡旋振荡20s，密封玻璃塞，置于80℃恒温烘箱中加热1小时，冷却后加入300mL甲苯，作为试样溶液，供气相色谱-质谱分析（色谱柱：DA-5MS, 30m×0.25mm×0.25µm，P/N:1525-3002）。

5. 结果

5.1 回收率实验（精密度和准确度）

将猪肝空白样品经过液液萃取初步处理后，分别添加一定量的标准溶液，配制1μg/L、2μg/L、5μg/L、10μg/L和100μg/L五个浓度的试样溶液，每批次内同一浓度做5次平行实验，共4个批次（样品典型回收率色谱图见附图）。

猪肝中实验结果列表如下：

添加浓度（μg/L）	回收浓度（μg/L）	平均回收值（μg/L）	平均回收率（%）	相对标准偏差（%）
1	0.75	0.72	72.40	5.93
	0.67
	0.72
	0.70
	0.78
2	1.62	1.63	81.30	1.23
	1.66
	1.60
	1.61
	1.64
5	4.02	4.24	84.80	4.16
	4.10
	4.27
	4.38
	4.43
10	8.24	8.45	84.45	2.81
	8.35
	8.77
	8.62
	8.25
100	90.24	9.12	91.15	2.86
	87.15
	91.77
	92.62
	93.95

批间	添加浓度（μg/L）
	1		2		5		10		100
	平均回收率%	RSD%	平均回收率%	RSD%	平均回收率%	RSD%	平均回收率%	RSD%	平均回收率%	RSD%
1	72.40	5.93	81.30	3.49	84.80	6.16	84.45	3.59	91.15	2.86
2	75.37	6.12	80.47	5.37	84.74	7.55	87.46	4.68	90.05	3.86
3	70.09	7.85	80.80	6.57	83.10	8.17	83.21	5.39	89.53	4.16
4	76.73	4.90	78.50	8.35	82.90	5.11	85.95	5.72	88.27	5.93
平均值	73.65	6.20	80.25	5.95	83.88	6.75	85.27	4.84	89.75	4.20
RSD%	12.95		10.79		9.43		7.00		5.75

	订货号	产品名称	规格	灵敏度
胶体金检测卡	HQ09001	盐酸克伦特罗(尿液)	50条/盒	3ppb
胶体金检测卡	HQ09001-1	盐酸克伦特罗(组织)	50条/盒	1ppb

ELISA快速检测试剂盒	订货号	产品名称	规格	灵敏度
	HE09002	盐酸克伦特罗	96孔	0.1ppb
	HE09002-1	盐酸克伦特罗	96孔	0.05ppb
	HE09002-2	盐酸克伦特罗	96孔	0.025ppb