【讨论】关于更换流动相的问题

应助达人

1、没明白楼主说的意思，做完样品后，要先自动排气（B泵）五分钟，此时用的流动相是什么，清洗液吗？再换上含甲醇较多的流动相，这个是保存液吗？
2、含有缓冲盐的流动相最好先用低有机相比例的流动相把缓冲离子清洗干净再换高比例的，防止缓冲离子与色谱柱形成牢固结合而损害色谱柱。
3、换流动相要先关泵，以防空气进入管路。

对，我们就是先用在用的缓冲盐来自动排气，再换成含甲醇较高的流动相来排气的。
看了你的话，我就理解成，我做完样品后，就把缓冲盐换成低有机相（含甲醇量少）的流动相排气，再换成高含量的有机相再流动一下？请问具体的清洗时间是多少呢？

应该都是20倍柱体积

懂你的意思了，你应该书初学者啊，你说的主要就是如何冲洗使用过盐的系统而已

应助达人

含缓冲体系的流动相做完样品后，直接把缓冲盐换成低有机相（含甲醇量少）的流动相排气，接着用同一低有机相流动相1.0流速清洗一个小，再用高有机相比例的流动相排气后，1.0流速清洗30-60分钟就行。

排气是为了减少换相时,产生汽泡,同时也可以使整个系统更快的充满流动相.

对，我是初学者

1、明白了，我之前没有用低有机相的流动，而是直接用缓冲盐来排气再用高有机相来清洗。
2、这样的话，下次开机再做是不是要反过来呢？也要用低有机相的来排气流动一小时，才可以换成缓冲盐再排气，再流动？
3、这样也太耗时间了吧，怎么要清洗排气那么久啊，关机前要用上二小时来清洗，可以缩短一下时间吗？

明白一个原则，只要是更换溶剂，如果过滤头暴露在空气中了，就有可能带来气泡，所以针对你更换的溶剂对应的管道需要排气，时间可以自己掌握排净为止；清洗色谱柱时，如果你之前用到了缓冲盐，首先把缓冲盐换成水冲洗掉，然后再用高有机相保存色谱柱，冲洗时间一般要20倍柱体积；如果你觉得耗时间，可以设序列为自动清洗，序列结束后自动停泵。