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【原创】简便、快速的瘦肉精测定方法

农残检测

  • 最近瘦肉精事情,使瘦肉精的测定也非常热,本人将10多年检测瘦肉精检测方法拿出来供大家参考,本月中旬我将在全国省级疾控培训班上推广。
    不管是GC/MS还是LC/MS分析,其前处理都可以参考如下:
    1、动物组织5.0g,加内标,加15mLpH5.2缓冲液,匀浆,加50ul酶液混匀,然后在37度下水解16小时(有人在50度下水解3小时),取出8000rpm离心10min,分出上清液,用2mol/L盐酸调节pH至2.0待用。
    2、SLS柱先用甲醇、水、40mmol/l活化,然后取上述一半水解液(8mL左右),过柱,水洗,甲醇洗,最后用10mL4%氨花乙酸乙酯洗脱收集,氮气吹干。
    3、GC/MS用硅烷化衍生测定,LC/MS用流动相溶解后进样分析。
    样品加标回收非常好,上述前处理省略了溶剂液液萃取过程,且净化非常干净。供大家参考,希望有借鉴作用。
  • 该帖子已被版主-默笙加3积分,加2经验;加分理由:感谢原创分享~
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  • yuduoling

    第1楼2011/04/09

    这个方法确实比较容易操作,可以试试

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  • lifang8115

    第2楼2011/04/12

    谢谢分享!请教下:乳粉、尿液中的盐酸克伦特罗怎么处理?尿液我们过完SCX小柱还是有颜色怎么充分净化?您的这个SLS柱是强阳离子交换柱吗?按照您的方法GCMS检出限是多少?内标物您选的是什么?加50ul酶液的作用是什么呢?

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  • pingguwu

    第3楼2011/04/13

    尿液过完SCX小柱还是有颜色,特别是衍生后很杂的,因此农业部的方法一般在SCX前再接一个C18柱。我们比较了国内外的很多净化柱,选择了这个阳离子交换柱SLS,内标最好用D9-克伦特罗,方法检出限制可以达到0.5ppb,但我们控制在1.0ppb,去年的CNAS考核,肝脏中克伦特罗3ppb左右,我们做的不错的。 加酶液是释放结合态的克伦特罗。

    lifang8115(lifang8115) 发表:谢谢分享!请教下:乳粉、尿液中的盐酸克伦特罗怎么处理?尿液我们过完SCX小柱还是有颜色怎么充分净化?您的这个SLS柱是强阳离子交换柱吗?按照您的方法GCMS检出限是多少?内标物您选的是什么?加50ul酶液的作用是什么呢?

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  • tm19850509

    第4楼2011/04/13

    我做了两个月的瘦肉精有以下经验大家分享下:

    C18小柱要看哪个牌子,好的牌子去杂质的效果好,不好的一点都没用,sls柱不会把样品中的杂质一起吸附,尤其是血红蛋白?建议前面加一个HLB小柱净化效果很好,还有加酶好像是让沙丁胺醇和莱克多巴胺从结合态变成游离态,盐酸克伦特罗不用酶解也行的

    这只是我的一点经验希望对您有用

    pingguwu(pingguwu) 发表: 尿液过完SCX小柱还是有颜色,特别是衍生后很杂的,因此农业部的方法一般在SCX前再接一个C18柱。我们比较了国内外的很多净化柱,选择了这个阳离子交换柱SLS,内标最好用D9-克伦特罗,方法检出限制可以达到0.5ppb,但我们控制在1.0ppb,去年的CNAS考核,肝脏中克伦特罗3ppb左右,我们做的不错的。 加酶液是释放结合态的克伦特罗。

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  • pingguwu

    第5楼2011/04/14

    我做了两个月的瘦肉精有以下经验大家分享下:
    C18小柱要看哪个牌子,好的牌子去杂质的效果好,不好的一点都没用,sls柱不会把样品中的杂质一起吸附,尤其是血红蛋白?建议前面加一个HLB小柱净化效果很好,还有加酶好像是让沙丁胺醇和莱克多巴胺从结合态变成游离态,盐酸克伦特罗不用酶解也行的
    这只是我的一点经验希望对您有用[/quote]

    你用这么多柱子,成本也太高太复杂了,你的步骤供学习一下?那个柱子好?

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  • tm19850509

    第6楼2011/04/14

    现在我在用hlb的柱子做,5g样品10ml乙酸铵酶解,加高氯酸去蛋白,过hlb和mcx柱,还在做回收率,分开过柱净化效果好,双柱连用净化效果一般,硅烷化后会有絮状沉淀不知道是什么东西,猜测是血红蛋白。
    以前我用过的方法5g样品10ml乙酸铵酶解,加高氯酸去蛋白调节ph至9.5乙酸乙酯异丙醇提取但是分层不明显,异丙醇和水溶解性太强,加Nacl后虽然能分层但吹干乙酸乙酯异丙醇会有盐析出来,并且回收率很不理想

    C18柱我用的是国产的,效果不好,用进口的会好点,hlb很不错,但是没有液液萃取效果好
    所以希望大家交流下,液液萃取怎么提高回收率,和有什么好的净化柱来代替液液萃取

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  • pingguwu

    第7楼2011/04/14

    用SLS柱效果很好的,我这次去郑州办班就用上述前处理方法。你过HLB和MCX前还要液液萃取?

    tm19850509(tm19850509) 发表:现在我在用hlb的柱子做,5g样品10ml乙酸铵酶解,加高氯酸去蛋白,过hlb和mcx柱,还在做回收率,分开过柱净化效果好,双柱连用净化效果一般,硅烷化后会有絮状沉淀不知道是什么东西,猜测是血红蛋白。
    以前我用过的方法5g样品10ml乙酸铵酶解,加高氯酸去蛋白调节ph至9.5乙酸乙酯异丙醇提取但是分层不明显,异丙醇和水溶解性太强,加Nacl后虽然能分层但吹干乙酸乙酯异丙醇会有盐析出来,并且回收率很不理想

    C18柱我用的是国产的,效果不好,用进口的会好点,hlb很不错,但是没有液液萃取效果好
    所以希望大家交流下,液液萃取怎么提高回收率,和有什么好的净化柱来代替液液萃取

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  • pingguwu

    第8楼2011/04/14

    按照你的方法,衍生后是否颜色很深,黄--红?

    tm19850509(tm19850509) 发表:现在我在用hlb的柱子做,5g样品10ml乙酸铵酶解,加高氯酸去蛋白,过hlb和mcx柱,还在做回收率,分开过柱净化效果好,双柱连用净化效果一般,硅烷化后会有絮状沉淀不知道是什么东西,猜测是血红蛋白。
    以前我用过的方法5g样品10ml乙酸铵酶解,加高氯酸去蛋白调节ph至9.5乙酸乙酯异丙醇提取但是分层不明显,异丙醇和水溶解性太强,加Nacl后虽然能分层但吹干乙酸乙酯异丙醇会有盐析出来,并且回收率很不理想

    C18柱我用的是国产的,效果不好,用进口的会好点,hlb很不错,但是没有液液萃取效果好
    所以希望大家交流下,液液萃取怎么提高回收率,和有什么好的净化柱来代替液液萃取

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  • tm19850509

    第9楼2011/04/15

    不用液液萃取

    pingguwu(pingguwu) 发表:用SLS柱效果很好的,我这次去郑州办班就用上述前处理方法。你过HLB和MCX前还要液液萃取?

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  • tm19850509

    第10楼2011/04/15

    最后衍生后是黄色,sls柱有详细资料吗?

    pingguwu(pingguwu) 发表:按照你的方法,衍生后是否颜色很深,黄--红?

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