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【求助】waters e2695+2489梯度洗脱不正常

液相色谱(LC)

  • 悬赏金额:0积分状态:已解决
  • 仪器配置:e2695+2489

    色谱条件:C18,203nm (中国药典2010年版一部423页)

    时间 乙腈 0.2%磷酸

    0~19min 30~35 70~65

    19~21min 35~50 65~50

    21~26min 50 50

    对照品:人参皂苷Rb3

    故障描述:此色谱条件为成熟条件,在同一实验室的其他仪器上可以顺利完成实验。

    同样的色谱柱和流动相,在此机器上出现,色谱峰的重复性极差。

    保留时间 峰面积

    第一针:21.958 450718

    第二针:20.283 187096

    第三针:21.096 365731

    第四针:23.733 171761

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  • steven20102010

    第2楼2011/04/16

    从色谱峰形看觉得你的柱效挺差的了,保留时间不重现检查一下泵吧。多灌注几次确保没有气泡!

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  • dony1985

    第3楼2011/04/16

    lz有2个问题
    1.保留时间漂移 2.进样重现性不好
    首先要确保是不是pump的问题
    楼主可以试下1ml/min,走十分钟,记录下得到液体的体积
    多试几次,看看体积的变化大不大
    然后用水和丙酮,做下梯度的准确性测试
    至于怎么做,你应该懂的
    最后,要解决进样rsd的问题,比较麻烦
    清洗,更换进样针擦拭组建都做下试试

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  • flyaway

    第4楼2011/04/17

    在哪看到色谱峰形了呀?

    steven20102010(steven20102010) 发表:从色谱峰形看觉得你的柱效挺差的了,保留时间不重现检查一下泵吧。多灌注几次确保没有气泡!

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  • yuduoling

    第5楼2011/04/17

    进样重现性不好,检查一下是不是泵的问题

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  • lanpishu23

    第6楼2011/04/17

    有问题,进样峰就不一样,而且好像有东西没出来啊,有东西残留在柱子里会对出分离度柱压有很大影响的。是不是有机相的梯度不准,小极性的东西冲不下来?建议设置100%的有机相测一下泵的准确度

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