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新购的氨基柱如何处理?

  • saxophonemusic
    2011/07/06
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 刚买了一条Waters的氨基柱,处理后柱效还可以。但上样品时,主峰的分离度特差,根本分布开。不知道是什么原因?是不是柱子前处理不好?谁能提供好的氨基柱处理方法?谢谢!
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  • saxophonemusic

    第1楼2011/07/06

    希望各位大侠帮忙

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  • 山羊

    第2楼2011/07/06

    介绍一点氨基柱的使用和保养知识不知有用否
    对于新购买到的柱子,首先请注意打开分析测试说明书,了解柱子的保存溶剂。如果保存溶剂与你将要使用的流动相极性不同不会互溶,请先用异丙醇过渡。过渡过程中注意因异丙醇粘度较大,会导致柱压很高,适当调低流速即可。如果要使用的流动相中还含有缓冲盐类,建议在用分析流动相之前,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡,这样可避免缓冲盐在分析柱内的析出。
    氨基柱的使用:
    需要注意的是,氨基柱的键合官能团氨丙基要比C18,C8柱的键合官能团C18,C8要容易水解,所以首先要做好其使用寿命稍逊的心理准备,特别是当你的使用条件是反相条件下时。
    反相条件下使用时,要特别注意控制PH值范围,PH值越低越有发生水解的危险,流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。所以,在使用后以及准备长时间放置该柱时,必要的清洗和将氨基柱保存于纯的有机溶剂中是很好的保养措施。
    氨基柱的清洗
    简单说起来,正相条件下使用的氨基柱你就参照硅胶柱的清洗方法;反相条件下使用的氨基柱你就参照C18的清洗方法。
    平时在正相条件下使用:
    首先用50倍柱体积的异丙醇清洗,因异丙醇粘度较大可适当放低流速;之后,用50倍的甲醇清洗;之后,用异丙醇过渡回到平常使用的正相流动相,即可。
    平时在反相条件下使用:
    缓冲盐应及时冲洗,以及不能直接用纯甲醇冲洗缓冲盐等,属常识就不作特别交待了。
    用50倍纯甲醇冲洗;之后,用异丙醇过渡后,用二氯甲烷冲洗色谱柱;之后,再用异丙醇过渡回来到甲醇条件下。
    这些清洗方法,主要是针对当样品中有杂质逐步吸附累积到填料上时的处理方法,色谱柱表现行为为诸如柱压增高柱效降低等

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  • 老多_小多

    第3楼2011/07/06

    柱效好就可以,分离度不行也许是色谱条件的问题

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  • saxophonemusic

    第4楼2011/07/06

    谢谢楼上两位老师

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  • zhaohua8011

    第5楼2011/07/06

    柱效好分离度不行,需要调整流动相比例或者流速、柱温等!

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  • yukepotato

    第6楼2011/07/07

    请问什么叫“处理后柱效还可以”,然后有分叉了啊?

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