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分子量相差不多的两个蛋白如何用液相检测

生物制药

  • 现在在做液相分析方法的优化。。。两个小分子蛋白的分子量相差不多,现在用分别用过C4和C18的柱子试过。。。流动相分别是0.1%三氟乙酸水和0.1%三氟乙酸乙腈,利用梯度洗脱。。。现在两个峰的出峰时间只相差零点几秒。。我有放缓冲洗的梯度、改变流速。。。希望大侠给点意见。。。不胜感激呢。。。。
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  • dahua1981

    第1楼2011/08/04

    应助达人

    实在不行就换柱子了

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  • cy_win

    第2楼2011/08/05

    谢谢。。。有哪些柱子?可以给个建议吗?

    dahua1981(dahua1981) 发表:实在不行就换柱子了

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  • 尐虎ル)ㄣ灬

    第3楼2011/08/08

    你可以试试改变一下PH值和有机相的比例,让出峰时间晚一点,可能更有利于你的检测。

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  • qiaolee744

    第4楼2011/08/19

    分子量相差不多?
    到底差多少
    如果分子量相差不是太小,可以考虑凝胶色谱柱(TOSOH柱)

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  • daoyuanli

    第5楼2011/09/02

    分子量差不多的话试试离子交换吧。
    SEC肯定是不行的,分子量的差别至少在两倍以上才可以用SEC分开的。

    qiaolee744(qiaolee744) 发表:分子量相差不多?
    到底差多少
    如果分子量相差不是太小,可以考虑凝胶色谱柱(TOSOH柱)

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  • tianru的爸爸

    第6楼2011/12/26

    如果分子量差不多,而C4和C18的差距也不大,那就是说凝胶和反相都不能很好地分离;
    那就换离子色谱法吧。

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  • maldiguy

    第7楼2012/01/31

    一定要分开么?对不是太复杂的蛋白混合物,很容易用质谱鉴定的
    可以尝试SCX (阳离子交换)

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  • lizihua02

    第8楼2012/02/10

    改变一下有机相的比例

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