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第2楼2006/02/28
我没做过这个,不过一次偶尔看过这个方法,传上来你看看吧,不知道对你有没有帮助:
一、4-氨基-3-联氨-5-疏基-1,2,4-三氮杂茂(简称AHMT)法定量:
1 应用范围
同薄层色谱法
2 原理
化妆品中甲醛与4-氨基-3-联氨-5-巯基-1,2,4-三氮杂茂在碱性条件下缩合,然后经高碘酸钾氧化成个巯基-5-三氮杂茂[4,3,b]四氮杂苯的紫红色化合物,其色泽深浅与甲醛含量成正比。
3试剂
3.1 AHMT溶液:称取4-氨基-3-联氨-5-疏基-1,2,4-三氮杂茂0.5g溶于100ml 0.5mo1/L盐酸中。此溶液置于棕色瓶中保存。
3.2 高碘酸钾溶液:称取0.75gKIO4,加100ml0.2mo1/L氢氧化钾置于水浴上加热溶解。
3.3 5mol/L Na0H溶液,AR。
3.4 甲醛标准贮备溶液:与(一)薄层色谱定性法同。
3.5甲醛标准溶液:与(一)薄层色谱定性法同。
4分析步骤
4.1样品预处理
与(一)薄层色谱定性法同。
4.2 测定
分别取2.0ml待测溶液置于具塞比色管中,加入2ml 5mo1/L的NaOH溶液,2ml AHMT溶液,轻轻颠倒混匀三次后(1),于室温下放置20min。然后加入2m1高碘酸钾溶液,轻轻振摇(避免激烈摇动,以免产生气泡)混匀(2),于550nm处测定待测溶液的吸光度。根据标准曲线求出待测溶液中甲醛的浓度。
4.3标准曲线的绘制:分别取甲醛标准液0.50、1.00,1.50、2.00ml置于比色管中,加水补足至2m1。以下按样品溶液分析方法操作。根据各标准溶液中甲醛的浓度与吸光度的对应关系绘制标准曲线。
注解:
(1)在加AHMT溶液后应轻轻颠倒混匀,否则会影响下一步缩合反应,使结果产生误差。
(2)若样品溶液中含有大量的碱土金属,样品在显色时可能产生混浊,加少量EDTA即可消除影响。
二、薄层色谱法(TLC):
1 适用范围
本方法适用于化妆品中六氯酚,双二氯酚硫醚、二氯酚和三溴水杨酞替苯胺的定性。
2 原理
样品经预处理后,样液中的卤代酚用的薄层色谱法进行分离、呈色,然后与标准斑点比较,进行定性。
3 试剂
3.1 乙醇:分析纯。
3.2 己烷:分析纯。
3.3 丙酮:分析纯。
3.4 无水硫酸钠:分析纯。
3. 5硫酸(lmol/L)。
3.6 六氯酚标准溶液(1):准确称取用苯重结晶的六氯酚50.0mg,加丙酮溶解后移入50ml容量瓶中并定容至刻度,避光保存。此溶液1ml含1.0mg六氯酚。
3.7 双二氯酚硫醚(2):准确称取用苯重结晶的双二氯酚硫醚50.omg,用丙酮溶解,移入50ml容量瓶中并定容至刻度,避光保存。此溶液lml含1.0mg二氯酚硫醚。
3.8双氯酚标准溶液(3):准确称取用甲苯重结晶的双氯酚50.0mg,用丙酮溶解,移入50ml容量瓶中,定容至刻度。此溶液1.0ml含1.0mg二氯酚,避光保存。
3.9三溴水杨酞替苯胺(4):准确称取用丙酮重结晶的三溴水杨酞替苯胺50.0mg,用丙酮溶解,移入50ml容量瓶中并定容至刻度。此溶液1.0ml含1.0mg三溴水杨酞替苯胺,避光保存。
3.10 乙醇一己烷(1+9)。
3.ll离子交换纤维素(5):将DEAE(二乙基氨基乙醇)纤维素,(交换量约0.9meg/g),浸泡于50倍量的0.lmol/L的盐酸中,用玻璃漏斗过滤,用20倍量的丙酮,30倍量的0.lmo1/L氢氧化钠溶液淋洗至OH-型后,用水洗成中性,再用20倍量的丙酮淋洗,弃去丙酮。空气中干燥。保存在乙醇十己烷(l+9)溶液中。
3.12 硅胶:薄层用硅胶中加有荧光剂。
3.13碱性氧化铝。
3.14展开剂:石油醚+冰乙酸(89+12)
3.15显色剂。
3.15.1 浓氨水。
3.15.2 2%4-氨基安替比林溶液:称取2g4-氨基安替比林用乙醇溶解稀释至100ml。
3.15.3 8%铁氰化钾溶液(K3[Fe(CN)6])。
3.15.4 2%三氯化铁溶液(FeCl3·6H20):称取2g三氯化铁用乙醇溶解稀释至100ml。
3.15.5 2%铁氰化钾溶液。
3.16 盐酸+丙酮溶液:9.5ml盐酸加丙酮至100ml(临用前配制)。
4 仪器
4.1 层析柱:、内径10mm、高200mm的具塞玻璃管的下端熔接玻璃过滤器或塞有玻璃棉,
4.2 紫外灯,具有8W功率,254nm波长。
4.3离子交换柱(6):将离子交换纤维素用乙醇+已烷(3.11)配成混悬液,:用湿式填充法缓慢倾入层析柱中,以防止产生气泡,填充高度80mm。
5 分析步骤
5.1样品预处理(7)(8)
称取含卤化酚0.5mg的样品(扑粉,除臭砂芯、香波约10g,膏霜约0.5g),置于100ml玻璃瓶中,连接好回流冷凝器:加50ml乙醇+已烷(1+9)溶液,2ml 1mol/L硫酸,于水浴上加热3min,冷却后用3号玻璃砂芯漏斗过滤,用乙醇+己烷(1+9)溶液5ml洗沉淀,滤液移入分液漏斗中静置分层。取己烷层用10ml水洗涤,无水硫酸钠脱水后以0.5ml/min的流速注入离子交换柱(10)。用50ml己烷洗涤。去除油脂等干扰物质,弃去淋洗液,依次用10ml丙酮、2ml丙酮+盐酸溶液(3.16),20ml丙酮洗脱(11)。溶出液在水溶上加热蒸去有机溶媒,加5ml乙醇,加热使盐酸挥发,重复此操作2次。残渣加2.0ml丙酮溶解,作为样品待测溶液。
5.2 制备薄层板
5.2.1硅胶薄层板:硅胶30g,加水约65ml,搅拌均匀,涂布成厚度0.25~0.3mm的薄层板,105~l10℃干燥30min,置干燥器中保存。
5.2.2含硝酸银的氧化铝薄层板:0.12g AgNO3,加少量水溶解,加30ml乙醇、20g氧化铝,调成浆状物,涂布厚度为0.25~O.3mm的薄层板,空气中干燥、于干燥器中避光保存。
5.3 点样
距薄层板底边2cm处将5~20μl待测溶液从左到右点样(12),两点间隔约1cm,薄员板.的右边点2μl标准溶液,空气中干燥。
5.4 展开
取适量展开剂(3.14)倾人展开槽中,将薄层板放入展开剂中,待溶剂上升约10cm,取出薄层板,空气中干燥。
5.5显色(13)
在薄层板上顺序喷雾显色剂3.15.1~3.15.3或3.15.4~3.15.5,六氯酚在显色剂3.15.1~3.15.3中为红色,在3.15.4~3.15.5中为蓝色斑点。二氯酚硫醚和三溴水杨酞替苯胺在3.15.1~3.15.5中为紫色,在3.15.4~3.15.5中呈现蓝色斑点。
用加荧光剂的硅胶薄层板测定时,各种卤代酚在紫外线照射下,在各自的Rf 值位置上以荧光为背景呈现出暗黑色的斑点。
注解:
(1)六氯[2,2′-Metbylenebis(3,4,6-trichlorophenol)](C13H6Cl6O2,406.93)是无臭、白色结晶性粉末,易溶液于丙酮、苯、乙醇、乙醚、氯仿等有机溶媒,不溶于水。
六氯酚具有二个羟基,在碱性下其中一个羟基和碱反应生成酚盐,另一个羟基具有杀菌效果。对革兰氏阳性菌有特效;对革兰氏阴性菌抑菌效果弱;对耐氧菌、芽胞菌、霉菌及螺旋体无效,石炭酸系数是125。一般添加在肥皂、膏霜、婴儿扑粉、洗发粉、洗发香波、生发水等化妆品中。本品是光敏物质之一。
(2)双二氯酚硫[2,2′thiobis(4,6-dichlorlphenol)](C12H6Cl4S,356.06)是无臭白色的结晶粉末,易溶于丙酮、乙醚,微溶于乙醇、氯仿,不溶于水。
用硝酸银+氧化铝薄层板时,放置在距紫外灯10cm以内照射30min,如有卤代酚可观察到灰~灰黑色斑点,比较样品溶液和标准溶液斑点的Rf值及色调,进行定性(12、13)。见表2-3-18。
表 2-3-18 各卤代酚的Rf 值和灵敏度
硅胶板(a) 含0.4%的氧化铝板
化合物名称 Rf 值 颜色和灵敏度(μg) Rf 值 灵敏度(μg)(UV254nm)
氨基比林法 三氯化铁法
六氯酚 0.44 红(5) 蓝(3) 0.56 (1)
二氯酚 0.15 红(5) 蓝(3) 0.17 (1)
溴氯化酚 0.48 红紫(5) 蓝(1) 0.64 (1)
双二氯酚硫醚 0.43 紫(5) 蓝(3) 0.52 (1)
水杨酸 0.08 红(5) 蓝(5) / /
四溴甲酚 0.41 紫(5) 蓝(1) 0.46 (5)
三溴水扬酰替苯胺 0.43 紫(5) 蓝(5) 0.47 (5)
对酚磺酸锌 0 红(5) 蓝(5) / /
蓝(3)
注 ( ) 内为灵敏度, μg。
(a)展开剂:石油醚+醋酸(88+12)。
双二氯酚硫醚具有二个羟基,过量的碱只和一个羟基反应,所以在碱性下仍具有杀菌效果,对革兰氏阳性菌有效。主要添加在消毒肥皂中。本品也是光敏物质。
(3)双氯酚[2,2.Methylenebis (4-chlorophenol)](C13H8Cl6O2,269.12)商品名称CompoundG4(SindarCorp)为白色粉末,稍有酚的臭味,溶于丙酮、乙醇,不溶于水。双氯酚是光敏物质。
(4)三溴水杨酰替苯胺(3,4′,5-Tribromosalicylicylanilide,C13H8O2NBr3,449.94)是白色细微粉末,有酚臭味,易溶于丙酮,微溶于甲醇、氯仿,不溶于水和苯。
(5)Br0wn 公司生产的DEAE纤维素,交换容量是0.89~9.2meq/g(Cl-型)。Serra公司生产的DEAE纤维素交换容量较小,约0.68meq/g,粒度也细。前者较适用。
(6)填充离子交换纤维素后,在层析管内插入直径1.5mm、长约250m的细玻璃捧,上下慢慢搅动,使纤维素悬浊,能有效地去除气泡。
(7)卤化酚在DEAE-纤维素层析柱和乙醇+己烷固-液相中进行分配,以除去油分等干扰。用丙酮+盐酸-丙酮溶液能定量地溶出六氯酚等杀菌剂。
(8)化妆品与特殊功能化妆品中六氯酚的使用量有很大差别。统一规定称样量是很困难的。膏霜类样品称取量大于lg时,前处理效果不理
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第3楼2006/02/28
不好意思,由于刚才那个表 2-3-18 各卤代酚的Rf 值和灵敏度
是在世台南弄了。所以,我把那个表又在Word文档里编辑了一下,以福建的形式传上来,你看看吧!~
表 2-3-18 各卤代酚的Rf 值和灵敏度