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LC-MS检测四环素类抗生素峰型差,响应弱

  • comeandgopjiu
    2011/08/17
  • 私聊

液质联用(LCMS)

  • 小弟用三重四级杆液质联用检测四环素类抗生素,结果发现TC、CTC、OTC的峰型都很差,就是峰太宽,峰高低,而且峰呈锯齿形,导致信噪比小,难以检测。同步检测的其他抗生素如磺胺类和大环内酯类是没有问题的。
    样品用磷酸盐乙腈混合溶液提取,色谱条件是C18柱,A:0.1%甲酸水溶液,B:甲醇,梯度洗脱。请教做好这方面实验的兄弟姐妹们LC-MS检测四环素要注意什么?是否出现过上述情况?大家用的色谱质谱条件怎样的?
    多谢。
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  • 论坛版主招募|新窦

    第1楼2011/08/17

    峰形差要优化一下流动相,有试过有机相用乙腈吗?

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  • comeandgopjiu

    第2楼2011/08/17

    想过几种可能
    换流动相,比如乙腈;
    换C18,用C8替代;
    流动相的甲酸浓度提高到0.5%。
    不知道做过四环素检测的高手们,都用的是什么条件,让我可以减少摸索的时间,毕竟我们单位不让自己操作。

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  • 胜邪

    第3楼2011/08/17

    A:0.1%甲酸水溶液,B:0.1%甲酸乙腈,
    C18,5cm,4um.
    600-800ul/min.
    尝试一下吧。

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  • zl1982

    第5楼2011/08/18

    A: 0.3%甲酸水溶液 B: 0.3%甲酸乙腈,
    C18,150*2.1mm,5um

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  • happy爱米粒

    第6楼2011/08/18

    我们用的是甲醇和含0.1%甲酸的5mM乙酸铵,如果使用waters的T3柱,峰行会好一些,呵呵

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  • inno12580

    第7楼2011/08/18

    请说一下梯度条件,参考一下,谢谢!

    xgy2005(xgy2005) 发表:我们用的是甲醇和含0.1%甲酸的5mM乙酸铵,如果使用waters的T3柱,峰行会好一些,呵呵

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  • wuyuandaai

    第8楼2011/08/20

    梯度条件自己有话一下不是好了,别人的、也未必是适合你的!

    inno12580(inno12580) 发表:请说一下梯度条件,参考一下,谢谢!

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  • qubin2000

    第9楼2011/08/22

    不同的C18柱,对四环素的峰形分离效果是不同的,要试不同厂家不同类型的柱子,不过总体来说,峰形不会很好,期望值不要太高

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  • kylabs

    第10楼2011/08/22

    你试试这个条件和方法吧:

    Method Conditions

    ColumnCogent Bidentate C18™, 4µm, 100A
    Catalog No.40018-75P
    Dimensions4.6 x 75 mm
    SolventsA: DI water + 0.1% formic acid
    B: acetonitrile + 0.1% formic acid
    Gradient
    time (min.)%B time (min.)%B
    010680
    430710
    Post time3 min.
    Flow rate1.0 mL/min.
    SampleUSP grade tetracycline HCl capsule extract (degraded).
    Stock Solution: 10.0 mg capsule contents were diluted with 10 mL 1.0 N HCl and sonicated for 10 min. 1 mL aliquot was diluted to 20 mL with DI water. Solution was heated at 80°C for 30 min. Solution was then diluted to 100 mL with DI water and filtered through a 0.45 µm nylon membrane HPLC filter (MicroSolv Technology Corp., Eatontown, NJ, USA).
    Working Solution: Stock solution was diluted 10x using 0.01 N HCl diluent.
    DetectionUV 360 nm (0? min) 430 nm (5? min)

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  • 菜头

    第11楼2011/08/29

    参考一下这篇文章吧,
    高效液相色谱法测定猪肉中四环素类抗生素及其代谢产物
    《中国卫生检验杂志》2010年 第5期
    waters T3 柱,乙腈(2:3)-0.2%甲酸溶液为流动相

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