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光度法测Zn含量

  • michellex87
    2011/09/17
  • 私聊

紫外可见分光光度计(UV)

  • 本人刚接触紫外-可见分光光度计,用可见分光光度测溶液中Zn的含量,得到回归方程为y=0.0313x+0.0419,R=0.9992。但是在实验中还是发现同一个样品的吸光度随着时间在波动,波动范围为0.003左右,再次取样,波动范围为0.01.这样正常么?
    另外在得到标准曲线后,我开始测未知溶液中Zn的含量,因为样品中Zn的含量很高,我把它稀释到15μg/ml左右,取样量为0.5ml、1.0ml配制25ml的溶液,测量计算得到结果分别为99.27%、98.77%。两此取样的相对偏差在0.5%,怎么能够减少误差呢?
    谢谢各位老师指教了!
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  • 老化验工

    第1楼2011/09/17

    含量高的成分分析,不应用高倍稀释的方法来凑合光度分析。吸光光度法的测定误差一般在1-3%(示差分析例外),而常量化学分析的误差一般在0.3%以内,不知道你的试液浓度在什么范围?
    多数显色反应是稳定的,你检查一下你的实验条件是否控制准确,有时是仪器性能的稳定性所致(如几分钟前后的读数波动),注意仪器开机自检通过后最好稳定20-30min后再开始测定。有时是显色体系还没有达到稳定,有个别体系需要显色一定时间后再测定。你应该做一个稳定性实验:取一份刚显色的溶液,立即测定A,然后每隔10分钟测一次,测到60-90min吧,用A对时间作图,看看关系线是否为水平,在哪段是水平,反复测试几次后,都有这个规律的话,水平线对应的时间范围就是你要测定时的时间了。

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  • 祥子

    第2楼2011/09/17

    波动0.003基本正常。

    0.01就不正常了。

    你样品室什么都不放,然后吸光度调零,看看波动有多大?

    误差0.5%, 我感觉不大吧。

    仪器基本没什么,就看你的制样和操作了。

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  • 祥子

    第3楼2011/09/17

    [quote]原文由 zlhuang0132(zlhuang0132) 发表:含量高的成分分析,不应用高倍稀释的方法来凑合光度分析。吸光光度法的测定误差一般在1-3%(示差分析例外),而常量化学分析的误差一般在0.3%以内,不知道你的试液浓度在什么范围?
    quote]

    吸光的测试误差这么大?

    常量化学分析是什么意思呢?

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  • mengzhaocheng

    第4楼2011/09/17

    应助达人

    我建议楼主多做几个浓度的样品试试,到时候能把那些特别异常的数据给排除掉。

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  • 老化验工

    第5楼2011/09/17

    常量分析指取量在100mg以上,10mL液体以上,常量成分分析指1%以上的含量。
    化学分析主要指滴定分析和重量分析,如果称重200mg,称量绝对误差为0.2mg(两次读数,按极差计),滴定体积若为20mL,读数绝对误差为0.02mL,体积误差也在0.1%,按误差传递的计算,一般常量成分的总分析误差不会超过0.3%(除非称量小了,滴定体积小)。
    光度分析,若按读数A为0.4计,末位波动值为0.004,这已经是1%的波动值了,光度计的测量误差为:ΔC/C=0.4343ΔT/(TlgT),如果仪器测量绝对误差ΔT=0.005,T=0.368(误差最小的T值)计算,测量误差为1.36%.
    所以,一般仪器分析书上认为普通光度分析的误差1-3%。
    此外,现在仪器操作都有工作站,由电脑来控制、测量和计算,仪器报出的数据可能有多位数字,ms精度很高,但精度高低不应该仅仅看报出的数据位数,主要应看平行测定多次时稳定不变的末位数是那一位,我认为,只有这一位往后推一位才是仪器测定波动的有效数字末位数(本人观点)。又如石墨炉测定中,仪器报出的数字可能有4-5位,ms精确,但连续加两次样的测定值却相差较大,所以,它又提供了一个相对偏差的显示值,你可以看出,有时同一样液的两次测定值偏差在XX%,可见,仪器报出的数字位数并不完全代表仪器测定的精确程度大小。

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  • 祥子

    第6楼2011/09/17

    谢谢zlhunang的耐心讲解。学习了。

    对于0.5%的T准确度,对T=0.368,误差1.36%,这应该是仪器引入的最小的误差了。

    你说的有效位数,也是。测试测量中,数据处理,有效位数就是看不动的后面一位,再往后就没意义了。

    仪器报出的数字位数,应该是反映了仪器的测量能力。

    如果仪器能精确测量到小数点后2位,它显示的一般是小数点后三位,肯定不会显示小数点后四位,因为那也是没意义。如果显示了四位,那精度肯定到3位了。

    至于样品的测量平行性,那应该是样品的准确度问题了。

    就像天平,精度是0.1g的天平,检定肯定用精度是0.01g的砝码,用1g的检定也是没意义。

    zlhuang0132(zlhuang0132) 发表:常量分析指取量在100mg以上,10mL液体以上,常量成分分析指1%以上的含量。
    化学分析主要指滴定分析和重量分析,如果称重200mg,称量绝对误差为0.2mg(两次读数,按极差计),滴定体积若为20mL,读数绝对误差为0.02mL,体积误差也在0.1%,按误差传递的计算,一般常量成分的总分析误差不会超过0.3%(除非称量小了,滴定体积小)。
    光度分析,若按读数A为0.4计,末位波动值为0.004,这已经是1%的波动值了,光度计的测量误差为:ΔC/C=0.4343ΔT/(TlgT),如果仪器测量绝对误差ΔT=0.005,T=0.368(误差最小的T值)计算,测量误差为1.36%.
    所以,一般仪器分析书上认为普通光度分析的误差1-3%。
    此外,现在仪器操作都有工作站,由电脑来控制、测量和计算,仪器报出的数据可能有多位数字,ms精度很高,但精度高低不应该仅仅看报出的数据位数,主要应看平行测定多次时稳定不变的末位数是那一位,我认为,只有这一位往后推一位才是仪器测定波动的有效数字末位数(本人观点)。又如石墨炉测定中,仪器报出的数字可能有4-5位,ms精确,但连续加两次样的测定值却相差较大,所以,它又提供了一个相对偏差的显示值,你可以看出,有时同一样液的两次测定值偏差在XX%,可见,仪器报出的数字位数并不完全代表仪器测定的精确程度大小。

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  • tutm

    第7楼2011/09/17

    楼主两次误差0.5%,这个结果对分光光度法来说已经非常好了

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  • michellex87

    第8楼2011/09/17

    谢谢您!
    我做测试时机器已预热30min,您建议我做稳定性试验,你所说的关系线水平应该是误差在多少范围内才算水平,因为我参考文献说显色10min后稳定,我一般是显色20min后开始测量,在测试时我发现一个样品的不稳定是连续测量的,就是放入样品后每隔1min测一次,没有像您说的做那么长时间,就做到了3min后,发现最大相隔0.01。
    还有你所说的测定误差在1-3%是怎么算的,为什么会有那么大的误差?
    谢谢

    zlhuang0132(zlhuang0132) 发表:含量高的成分分析,不应用高倍稀释的方法来凑合光度分析。吸光光度法的测定误差一般在1-3%(示差分析例外),而常量化学分析的误差一般在0.3%以内,不知道你的试液浓度在什么范围?
    多数显色反应是稳定的,你检查一下你的实验条件是否控制准确,有时是仪器性能的稳定性所致(如几分钟前后的读数波动),注意仪器开机自检通过后最好稳定20-30min后再开始测定。有时是显色体系还没有达到稳定,有个别体系需要显色一定时间后再测定。你应该做一个稳定性实验:取一份刚显色的溶液,立即测定A,然后每隔10分钟测一次,测到60-90min吧,用A对时间作图,看看关系线是否为水平,在哪段是水平,反复测试几次后,都有这个规律的话,水平线对应的时间范围就是你要测定时的时间了。

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  • michellex87

    第9楼2011/09/17

    祥子老师,您好!
    我看到您们讨论的时吸光度的绝对误差,但我想知道的是,这种误差会对测试样品的结果产生多大的误差?为什么我取样量的不一样会造成结果误差那么多,如果用100μl-1000ul移液器取3ml的样品准确还是用1-5ml的移液管取准确呢?因为我是自己配置的ZnO%含量在99%的溶液,得出取样0.5ml结果在99.27%,取样1.0ml,结果在98.77%,误差还比较大。另外我还想知道,我做平行样时,误差多大还是比较正常的呢?

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  • michellex87

    第10楼2011/09/17

    Lambda

    祥子(nemoium) 发表:谢谢zlhunang的耐心讲解。学习了。

    对于0.5%的T准确度,对T=0.368,误差1.36%,这应该是仪器引入的最小的误差了。

    你说的有效位数,也是。测试测量中,数据处理,有效位数就是看不动的后面一位,再往后就没意义了。

    仪器报出的数字位数,应该是反映了仪器的测量能力。

    如果仪器能精确测量到小数点后2位,它显示的一般是小数点后三位,肯定不会显示小数点后四位,因为那也是没意义。如果显示了四位,那精度肯定到3位了。

    至于样品的测量平行性,那应该是样品的准确度问题了。

    就像天平,精度是0.1g的天平,检定肯定用精度是0.01g的砝码,用1g的检定也是没意义。

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