dahua1981
第2楼2011/09/29
在正相色谱中,固定相的水分含量常常是个影响选择性的关键参数。大部分溶剂都内含有小部分的溶解水分(正己烷20摄氏度下水分含量是0.0111% w/w ), 正相色谱柱中水分含量随时间的不同是导致选择性变化的最普通的一个因素。
用含2.5 % 二甲氧基丙烷(dimethoxypropane)和2.5 % 冰醋酸的正己烷冲洗色谱柱30个柱体积,可以去除色谱柱中水分并恢复色谱柱原来或所需要的选择性。
原理为:冰醋酸是纯的无水乙酸,具有较强的吸湿性;二甲氧基丙烷(DMP)则能和水反应。至于为什么选二者组合和这样的浓度来除硅胶柱上的水份,肯定是前人经验的总结,别人用了效果也比较好,就一直沿用。
考虑到从流动相和色谱柱中完全去除水分非常困难,还有个尚有争议的简单方法可以采用。使用水分含量可控的流动相(譬如和水半饱和)以一直保持最初的方法选择性,而不需要每次进行冗长的除水分步骤。不管何种情况,最重要的都是保持水分条件的一致性。