rdc
第4楼2006/03/28
一般分子量五六千以下的多肽或者小蛋白,记一些两维的同核谱就可以,cosy,tocsy,noesy等都是必须的,这些谱综合起来完成化学位移认证和距离约束的认证;
对于分子量接近一万的蛋白,同核谱解的难度已经相当大了,这时需要做N标,C标或者N,C双标,然后记一些三共振实验,通过CBCACONH-CBCANH,HNCO-HNCACO等成对的实验完成主链认证,然后根据HBHACONH,CCCONH,HCCCONH,HCCHCOSY,HCCHTOCSY等实验进行侧链化学位移的归属,最后根据N15-NOESY和C13NOESY得到的距离信息进行结构计算;
对于分子量2万以上的蛋白,由于分子量太大,弛豫时间变短,线宽增加,还需要做氘标,利用TROSY效应,偶极耦合等方法得到更多的信息.