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请教高手,如何用核磁检测蛋白质的结构

核磁共振技术(NMR)

  • 请教高手,如何用核磁检测蛋白质的结构
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  • lhw016

    第1楼2006/03/12

    非常麻烦,要做一系列的二维三维的谱图,HSQC,TROSY等等,光是解谱也得几个月

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  • 10510056

    第2楼2006/03/14

    没必要把谱全解开吧?抓住几个特征峰不就省事多了?

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  • dearfish

    第3楼2006/03/15

    而且也不单是做C谱和H谱。北京核磁中心就专门做这个的,你可以去他们主页看看

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  • rdc

    第4楼2006/03/28

    一般分子量五六千以下的多肽或者小蛋白,记一些两维的同核谱就可以,cosy,tocsy,noesy等都是必须的,这些谱综合起来完成化学位移认证和距离约束的认证;
    对于分子量接近一万的蛋白,同核谱解的难度已经相当大了,这时需要做N标,C标或者N,C双标,然后记一些三共振实验,通过CBCACONH-CBCANH,HNCO-HNCACO等成对的实验完成主链认证,然后根据HBHACONH,CCCONH,HCCCONH,HCCHCOSY,HCCHTOCSY等实验进行侧链化学位移的归属,最后根据N15-NOESY和C13NOESY得到的距离信息进行结构计算;
    对于分子量2万以上的蛋白,由于分子量太大,弛豫时间变短,线宽增加,还需要做氘标,利用TROSY效应,偶极耦合等方法得到更多的信息.

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