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关于顺序的问题

冷冷的冰雨

2011/11/25

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讨论问题：相同成分在不同色谱图谱中的顺序一样不一样，咱们就举个实例吧！
大黄有5个成分芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚，请问在TLC图谱中的成分斑点顺序和HPLC图谱中的成分出峰顺序是一样的吗？
在hplc中的顺序是？
在TLC中的顺序是？

fengmo4668 2011/11/25

TLC的固定相是硅胶；如果你HPLC用的也是硅胶正相柱，且TLC用的展开剂的种类和流动相用的种类一样的时候，出峰的顺序就是一致的。比例不同时，各物质之间的保留时间差距不一样而已，但是顺序是一样的。但如果种类就不同，根据相似相容原理，出峰顺序不一致也是可能的。再说HPLC为反相柱，出峰顺序相不相反不敢说，但肯定和TLC是不一致，没说的。

dahua1981 2011/11/25

tlc也有正反相 hplc也有正反向就是相同也不见得出峰顺序酒一样

xiaowang268 2011/11/25

保留机制是不一样的，主要还是结构

雪妖 2011/11/26

fengmo分析得很详细 C18柱上面出峰顺序不一样，和C18柱的选择性也有关系，相同的条件在不同的品牌上C18也有可能出峰顺序不一样

头像更新中，请稍候… 2011/11/27

[quote]原文由 [b]雪妖(czj_1027)[/b] 发表: fengmo分析得很详细 C18柱上面出峰顺序不一样，和C18柱的选择性也有关系，相同的条件在不同的品牌上C18也有可能出峰顺序不一样[/quote] 上次我就想发这个来着，哈哈不过好像我已经发过了，我找贴子看看

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fengmo4668

第1楼2011/11/25

TLC的固定相是硅胶；
如果你HPLC用的也是硅胶正相柱，且TLC用的展开剂的种类和流动相用的种类一样的时候，出峰的顺序就是一致的。比例不同时，各物质之间的保留时间差距不一样而已，但是顺序是一样的。

但如果种类就不同，根据相似相容原理，出峰顺序不一致也是可能的。

再说HPLC为反相柱，出峰顺序相不相反不敢说，但肯定和TLC是不一致，没说的。

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dahua1981

第2楼2011/11/25

应助达人

tlc也有正反相
hplc也有正反向
就是相同也不见得出峰顺序酒一样

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冷冷的冰雨

第3楼2011/11/25

看具体是实例，大黄中的成分，应该不会用HPLC正相，TLC应该也是常规的吧
fengmo4668(fengmo4668) 发表:TLC的固定相是硅胶；
如果你HPLC用的也是硅胶正相柱，且TLC用的展开剂的种类和流动相用的种类一样的时候，出峰的顺序就是一致的。比例不同时，各物质之间的保留时间差距不一样而已，但是顺序是一样的。

但如果种类就不同，根据相似相容原理，出峰顺序不一致也是可能的。

再说HPLC为反相柱，出峰顺序相不相反不敢说，但肯定和TLC是不一致，没说的。

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冷冷的冰雨

第4楼2011/11/25

为什么？请讲讲原因
dahua1981(dahua1981) 发表:tlc也有正反相
hplc也有正反向
就是相同也不见得出峰顺序酒一样

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fengmo4668

第5楼2011/11/25

没有做过大黄。

只能这样作答：
常规的tlc就是硅胶板子。
HPLC如果用反相，就自动套我上面的分析里的话吧。
冷冷的冰雨(xy4585618) 发表:看具体是实例，大黄中的成分，应该不会用HPLC正相，TLC应该也是常规的吧

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冷冷的冰雨

第6楼2011/11/25

tlc就是硅胶板子，跟每个化合物的极性有很大关系，和流动相的关系不大。
fengmo4668(fengmo4668) 发表:没有做过大黄。

只能这样作答：
常规的tlc就是硅胶板子。
HPLC如果用反相，就自动套我上面的分析里的话吧。

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fengmo4668

第7楼2011/11/25

相似相溶原理。
同样是正向或者反相，用的展开剂和流动性的种类不一样（差别大的话），出峰顺序就会有出入。
但大概情形还是可以判定的。
ＴＬＣ板，极性小的在上边，极性大的在下边。正相柱也是如此。
反相柱相反。极性大的在前面，极性小的在后面。
冷冷的冰雨(xy4585618) 发表:为什么？请讲讲原因

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冷冷的冰雨

第8楼2011/11/25

赞成
fengmo4668(fengmo4668) 发表:相似相溶原理。
同样是正向或者反相，用的展开剂和流动性的种类不一样（差别大的话），出峰顺序就会有出入。
但大概情形还是可以判定的。
ＴＬＣ板，极性小的在上边，极性大的在下边。正相柱也是如此。
反相柱相反。极性大的在前面，极性小的在后面。

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冷冷的冰雨

第9楼2011/11/25

讨论的问题是不是有些专业了？还是搞药的人太少了？
kiak出来解决一下问题

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冷冷的冰雨

第10楼2011/11/25

有必要介绍一下背景知识：

1、正相色谱用极性固定相，流动相为相对非极性的溶剂，常用于分离中等极性和极性较强的化合物。正相色谱的样品被吸附在极性固定相上，通过增加流动相的极性，极性小的物质先被洗脱先来，极性大的后被洗脱下来

2、反相色谱法一般用非极性固定相（如C18、C8）；流动相为水或缓冲液，常加入甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等与水互溶的有机溶剂以调节保留时间，适用于分离非极性和极性较弱的化合物。反相色谱的样品被吸附在非极性固定相上，通过增加流动相的非极性，极性大的物质先被洗脱先来，极性小的后被洗脱下来

液相色谱的柱子通常分为正相柱和反相柱。正相柱大多以硅胶为主，或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱；反相柱填料主要以硅胶为基质，在其表面键合非极性的十八烷基官能团（ODS）称为C18柱，其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。

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