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[求助]糖柱做糖类分析为什么那么复杂?

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  • 最近看到有个老师用糖柱做糖类分析先要冲洗系统,然后升温到85度再反冲柱子,好几个小时,再然后正面平衡很久,
    对这个我不是很理解,有哪位高手可以为我授业解惑呢?呵呵
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  • xiongbb

    第1楼2011/11/29

    糖类分析柱保留基理:糖分析柱的分离原理是基于配体交换反应。糖分子上每一个羟基都带有一个非常弱的负电荷,而端基异构碳上所带的羟基可被去质子化,从而带上一个很强的负电荷.糖分子上的这些负电荷与树脂表面上的金属离子的正电荷之间的相互作用使糖被保留,从而达到分离。

    平衡时间较长和反冲都是为了保证新柱能在分析使用之前得到足够的钙离子的平衡,只有柱子上面金属离子稳定且显活性才能对样品有保留。
    将柱子按照通常使用的反方向安装(标签上的箭头指向柱子的入口端).也可用反冲阀.,用至少100ml的0.001M的EDTA钙盐溶液在90℃用0.5ml/min流速反冲柱子.500mg/L的EDTA钙盐的浓度大约为0.001M. ,将柱子反过来(回到通常的流动方向)用分析所用的流动相冲柱子,(用与上一个步骤同样的条件)直到基线平稳方可使用。

    不知道能不能帮到你,嘻嘻哈哈~

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  • yhzp0801

    第2楼2011/11/29

    呵呵,懂点了,那这个EDTA钙离子死用来做什么的呢?

    xiongbb(xiongbb) 发表:糖类分析柱保留基理:糖分析柱的分离原理是基于配体交换反应。糖分子上每一个羟基都带有一个非常弱的负电荷,而端基异构碳上所带的羟基可被去质子化,从而带上一个很强的负电荷.糖分子上的这些负电荷与树脂表面上的金属离子的正电荷之间的相互作用使糖被保留,从而达到分离。

    平衡时间较长和反冲都是为了保证新柱能在分析使用之前得到足够的钙离子的平衡,只有柱子上面金属离子稳定且显活性才能对样品有保留。
    将柱子按照通常使用的反方向安装(标签上的箭头指向柱子的入口端).也可用反冲阀.,用至少100ml的0.001M的EDTA钙盐溶液在90℃用0.5ml/min流速反冲柱子.500mg/L的EDTA钙盐的浓度大约为0.001M. ,将柱子反过来(回到通常的流动方向)用分析所用的流动相冲柱子,(用与上一个步骤同样的条件)直到基线平稳方可使用。

    不知道能不能帮到你,嘻嘻哈哈~

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  • yuhou_xiexie

    第3楼2011/11/29

    很多老师都用氨基柱做糖分析,查了下论文数据库,用氨基柱的还真不少,这个比树脂有优势吗?

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  • yhzp0801

    第4楼2011/11/29

    我也见过有老师做糖类的分析是用的氨基柱,不知道氨基柱的原理是什么?和树脂的方法各自的优缺点在什么地方?

    yuhou_xiexie(yuhou_xiexie) 发表:很多老师都用氨基柱做糖分析,查了下论文数据库,用氨基柱的还真不少,这个比树脂有优势吗?

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  • tangtang

    第5楼2011/11/29

    氨基柱的寿命比较短。

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  • yhzp0801

    第6楼2011/11/30

    为什么会寿命短呢?

    tangtang(tangtang) 发表:氨基柱的寿命比较短。

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  • xiongbb

    第7楼2011/11/30

    一般做糖流动相会用水相比较多,氨基长期在水相条件下,和硅羟基作用,造成的柱流失。

    yhzp0801(yhzp0801) 发表:为什么会寿命短呢?

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  • xiongbb

    第8楼2011/11/30

    平衡树脂表面的金属离子,金属离子一般是钙离子

    yhzp0801(yhzp0801) 发表:呵呵,懂点了,那这个EDTA钙离子死用来做什么的呢?

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  • yhzp0801

    第9楼2011/12/01

    这些树脂都是什么样的?结构能描述一下么?

    xiongbb(xiongbb) 发表:平衡树脂表面的金属离子,金属离子一般是钙离子

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  • xiongbb

    第10楼2011/12/02

    这个我就不能帮到你了,我只知道一般是聚合物,类似于聚乙烯二乙烯苯,上面在搭载活性基团,说的不一定对哦,

    yhzp0801(yhzp0801) 发表:这些树脂都是什么样的?结构能描述一下么?

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