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电镜扫描物质分析问题,不是很明白。

  • jianfkunzhong
    2011/12/13
  • 私聊

扫描电镜(SEM/EDS)

  • 微生物样品处理
    第一做电镜扫描,处理四膜虫的样品,没有临界点干燥仪,只有冷冻干燥仪。准备用叔丁醇,然后进行冷冻干燥,不知是不是可行,一般冷冻干燥需多长时间?还有制好样品后需要马上就进行镀膜、电镜吗,还是可以放一放???有点着急啊,希望能尽快得到大家的帮助、、谢啦
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    第1楼2011/12/19

    没做过,冷冻干燥仪没有说明所需要的干燥时间吗

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  • 社区=冬季=

    第2楼2011/12/19

    百度来的:

     化学方法制备样品  其程序通常是:清洗→化学固定→干燥→喷镀金属。

      清洗  某些生物材料表面常附血液、细胞碎片、消化道内的食物残渣、细菌、淋巴液及粘液等异物,掩盖着欲观察的部位,因而,需要在固定之前用生理盐水或等渗缓冲液等把附着物清洗干净。亦可用 5%碳酸钠冲洗或酶消化法去除这些异物。

      固定  通常采用醛类(主要是戊二醛和多聚甲醛)与四氧化锇双固定,也可用四氧化锇单固定。四氧化锇固定不仅可良好地保存组织细胞结构,而且能增加材料的导电性和二次电子产额,提高扫描电子显微图像的质量。这对高分辨扫描电子显微术是极端重要的。为增强这种效果,可用四氧化锇-单宁酸或是四氧化锇-珠叉二胼等反复处理材料,使其结合更多的重金属锇,这就是导电染色。

      干燥  固定后通常采用临界点干燥法。其原理是:适当选择温度和压力,使液体达到临界状态(液态和气相间界面消失),从而避免在干燥过程中由水的表面张力所造成的样品变形。对含水生物材料直接进行临界点干燥时,水的临界温度和压力不能过高(37.4℃,218帕)。通常用乙醇或丙酮等使材料脱水,再用一种中间介质,如醋酸戊酯,置换脱水剂,然后在临界点干燥器中用液体或固体二氧化碳、氟利昂 13以及N2O等置换剂置换中间介质,进行临界干燥。

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