NanoPhotometerTM——超微量分光光度计最佳选择
摘要:由于传统的紫外-可见分光光度计对样品量的需求较大,而且对所测样品的浓度有一定范围的限制,对于分子生物学实验者来说,对少量又珍贵的核酸蛋白质样品的稀释,无疑是一种糟蹋。为了满足和方便广大生物学科研者的实验需求,德国Implen 公司研发出一款通过改变光程从而达到扩大样品浓度检测范围的目的的超微量紫外—可见分光光度计,它所需上样量只有0.3-2ul,能够检测核酸浓度和纯度,蛋白质A280等,内置BCA,Bradford等多种实用检测方法。同时可使用常规比色皿,用于细胞(细菌)OD600的测量。
关键词:超微量,分光光度计,光程,核酸蛋白质浓度,OD600。
前言
核酸纯度和蛋白质浓度的测定,是分子生物学实验的常规操作之一,传统的紫外—可见分光光度计对样品量的要求较高,一般在500ul(特殊比色皿)以上,而500ul的蛋白质或核酸,对科研人员来说可能是半年来所提取核酸(蛋白质)的总量,因此,常规分光光度计在进行核酸(蛋白质)浓度的测定具有很大的局限性。Implen (德国,慕尼黑) 公司研发的超微量紫外—可见分光光度计通过使用特制的超微量比色皿,使得只需0.3-5ul的上样量就能准确的检测出样品浓度。通过对光程的调节,不但能够检测低浓度的样品(0.2ng/ul),也能够检测高浓度的样品(18750ng/ul)。
NanophotometerTM性能特点
具有专利权的样品压缩技术:
NanophotometerTM 利用两个光学平面镜将样品固定于上样孔(石英检测窗口和光学平面镜稀释盖)。这种改变光程的技术不依赖样品的表面张力,同时,在很大程度上减少了样品的蒸发,保证了很好的重复性,尤其是溶于易挥发溶剂中的样品。NanophotometerTM有6个不同稀释倍数的样品稀释盖,同时也可使用常规比色皿进行检测。
由于具有多个稀释倍数的能力,所以NanophotometerTM的检测浓度范围测非常广阔:dsDNA:2-19750ng/ul; ssDNA:2-13875ng/ul; RNA:2-15000ug/ul; Oligo:2-12375ng/ul。蛋白质浓度检测范围在0.04mg/ml至660mg/ml之间。因此,几乎所有样品都不需要稀释而直接可进行浓度测定(适合全波长扫描)。NanophotometerTM 的全波长扫描只需3.5s,每个样品所需要的时间不到5秒钟,快速的检测速度为大量的样品检测节省了宝贵时间。
0.3ul的上样量:
NanophotometerTM 特制的样品压缩技术,使得所需上样量非常少,仅需0.3ul的样品就可准确检测所测物质的浓度。
2ng/ul到1875ng/ul的检测范围(dsDNA):
NanophotometerTM 特有的样品压缩技术能够将样品自动稀释为1:5,1:10,1:50,1:100和1:250五种倍数,无稀释误差,并减少手动稀释所浪费的时间,保证了样品的稳定性。由于缩短了光程,所以增大了浓度检测的范围。NanophotometerTM 的最小光程为0.04mm,是常规比色皿光程的二百五十分之一,因此比常规紫外—可见分光光度计所测浓度范围大250倍。下表为稀释倍数所对应光程:
5→d=2 mm; 10→d=1 mm; 50→d=0.2 mm; 100→d=0.1 mm; 250→d=0.04mm
全谱扫描仅需3.5s:
NanophotometerTM 的波长范围190—1100nm,系统启动时间小于5s,且无需预热,全波长扫描时间(200—950nm)只需3.5s,宽的波长范围满足常规物质的测定,NanophotometerTM 内置多种波长扫描方法,有单波长扫描、比色测定、波长扫描(自定义范围)、动力学测定、标准曲线测定、多波长扫描(5个波长点)和吸光度比值(两个吸光度比值)。
灵活的数据输出方式:
NanophotometerTM 的数据输出方式有内置打印机、SD-RAM卡、USB或者蓝牙可供选择。内置打印机可以方便的将实验结果马上打印,方便重要数据的保存和分析;USB接口连接电脑,一些需要长久保留的数据可方便的储存到个人电脑中。
卓越的设计:
独特的人体工程学理念,超大的背光蓝色液晶显示器,自定义用户界面,易于清洗的可移动样品室,用户友好型操作界面和防滑的控制面板,即使带有内置打印机,也易于携带,可用于户外操作。
终身无需校正:
密封的光路系统且无拆换部件,采用独特的光程改变技术,使得该NanophotometerTM 超微量紫外—可见分光光度计具有很高的精度,且终身无需校正,免去了昂贵的校正费用,节省宝贵的时间。
总结
NanophotometerTM 的样品压缩技术使得其具有卓越的检测和稳定性能,在同类产品中,由于它改变光程的技术不依赖于被测溶液的表面张力,从而扩大检测范围,而且这种改变光程的方法不涉及机械磨损或机械疲劳,故光程的改变是非常精确的,终身无需校正。总的来说,NanophotometerTM超微量分光光度计是一款上样量少、检测快速、重复性高、应用范围广、准确耐用,适合常规的综合生物实验室使用的微量紫外分光光度计。
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