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平时液相色谱测定样品的时候,大家如何选择波长的?

  • 马踏飞燕
    2011/12/28
  • 私聊

厂商论坛

  • 如题:
    看书籍上面说要从下面几个方面考虑:不知道大家平时都是怎么选择的,讨论一下,谢谢!


    1. 检测波长要大于溶剂截止波长;

    2. 选择一个对大多数组分都有较大吸收的波长;

    3. 外标法定量时,要选择被测组份最大吸收波长。

    我对第三个没有搞明白啊,譬如254nm
    对常见的共轭结构和羰基官能团都有吸收,对饱和基团也有弱的吸收。但是对于常见的乙腈、甲醇的透过率很高,实在不知道用什么波长是最理想的实验波长??各位平时如何整的呢??
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  • 马踏飞燕

    第1楼2011/12/28

    应助达人

    就是外标法测定时的选择感觉很郁闷啊,有时候的测定如何选择波长呢?
    半瓶水来求教了。

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  • 小卢

    第2楼2011/12/28

    关于最大吸收一般情况下是告知的,如果未知,可以用dad看下最大吸收在哪里

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  • 马踏飞燕

    第3楼2011/12/28

    应助达人

    卢版:
    那么测定组分复杂的情况下呢?

    小卢(luxw) 发表:关于最大吸收一般情况下是告知的,如果未知,可以用dad看下最大吸收在哪里

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  • fengmo4668

    第4楼2011/12/29

    卢版都说了么,用dad来扫描各自的紫外吸收波长。
    这个的前提是要先筛选出合适的色谱条件将复杂的组份完全分开。

    马踏飞燕(langhuashang) 发表:卢版:
    那么测定组分复杂的情况下呢?

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  • fengmo4668

    第5楼2011/12/29

    外标法测定时,是针对于某一个物质做外表的含量测定。
    为了更准确的测定出该物质的含量,该物质的峰面积越大越好,因为峰面积的数值越大,液相色谱系统带来的误差越小。
    基于这一原则,自然要找该物质的自大吸收波长最为测定波长了。

    马踏飞燕(langhuashang) 发表:就是外标法测定时的选择感觉很郁闷啊,有时候的测定如何选择波长呢?
    半瓶水来求教了。

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  • 马踏飞燕

    第7楼2011/12/29

    应助达人

    哦,我笨拙 那么对“譬如254nm 对常见的共轭结构和羰基官能团都有吸收,对饱和基团也有弱的吸收。但是对于常见的乙腈、甲醇的透过率很高,实在不知道用什么波长是最理想的实验波长??”这个该如何选择呢???请教了。

    fengmo4668(fengmo4668) 发表:卢版都说了么,用dad来扫描各自的紫外吸收波长。
    这个的前提是要先筛选出合适的色谱条件将复杂的组份完全分开。

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  • 马踏飞燕

    第8楼2011/12/29

    应助达人

    这个我理解的,麻烦您仔细看看我的帖子最后的那句话,然后给我解释一下即可,谢谢。

    fengmo4668(fengmo4668) 发表:外标法测定时,是针对于某一个物质做外表的含量测定。
    为了更准确的测定出该物质的含量,该物质的峰面积越大越好,因为峰面积的数值越大,液相色谱系统带来的误差越小。
    基于这一原则,自然要找该物质的自大吸收波长最为测定波长了。

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  • fengmo4668

    第9楼2011/12/29

    前半句,是说254nm对于一般的物质来说,都可以作为选择对象。
    “常见的乙腈、甲醇的透过率高”,说明乙腈、甲醇在254nm处的吸光度很小,对样品的影响很小。

    其它行业不知道,对于制药行业来说,主成分的有关物质会要求比较严格。
    选择其它波长,可能在在这个波长下没有那么多的杂质峰出现。
    但是在这个波长下的紫外检测器检测不到杂质峰,不代表该地方没有杂质峰。
    所以,对波长没有特别要求时,做有关物质,254nm就非常有利了。

    马踏飞燕(langhuashang) 发表:哦,我笨拙 那么对“譬如254nm 对常见的共轭结构和羰基官能团都有吸收,对饱和基团也有弱的吸收。但是对于常见的乙腈、甲醇的透过率很高,实在不知道用什么波长是最理想的实验波长??”这个该如何选择呢???请教了。

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  • ruifen0000

    第10楼2011/12/29

    先用DAD做方法,找个方法使得杂质和主峰完全分离,然后选择主峰的最大吸收波长作为检测波长用外标法定量就可以了 。

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