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选购PCR仪的注意事项

常用设备综合讨论

  • 准确的讲包括实时荧光定量在内都没有自动加样和标本处理系统,只能算半自动的。PCR是个简单的东东,一个温控设备和一个检测设备而已。
    关于温控,主要是介质问题。理想的介质是导热性好、比热大、接触紧密的东东。
    这方面最好的是水浴和油浴,比热大(油比水更大)、溶剂化物体,与反应物无缝接触,效果当然最好。但是自动化,小型化难,只有最初的水浴锅式使用。

    硅加热,这是使用最普遍的一种,优点:易自动化、速度快、直接加热降温,效果当然好,但是第一成本较高,第二其使用的介质是金属,导热虽然好,但是与反应管,很难做到无缝接触,定性时代可以加油,但用荧光定最,由于油有荧光信号不能用。所以在无缝接触上差一些。第三由于是底部加热,下部压力较大,有溢出的可能,不过新的仪器在加热盖以后解决了这个问题。

    空气加热,用空气做介质有优点,与反应体系无缝接触,但是空气的导热性差、比热小的弱点明显。因此空气加热的要利用离心来产生空气流动,增强导热性,同时使用毛细管,加大接触面积、试剂微量化来弥补。这样做了以后效果还是不错。但有的厂商把什么离心、毛细管的好处大讲特讲,对气加热的弱点闭口不谈,却是高明的市场手法。同时,使用离心,对标本量增大是有影响的并且标本量越大,空气比热小的弱点就越明显,所以空所加热的仪器标本量都比较小。使用毛细管后由于反应液与管的接触面积增大,吸附现象更大,因此试剂的通用性差一般要专门开发,成本高,虽然试剂用量少,但因为是专用试剂,每人份就是以实际量算,并不省试剂。反而增加了毛细管成本。

    关于功能,所有的PCR仪功能都大体相同。只有MJ孔间能使用不同温度比较独特,这对于多项目同时检测以及循环参数的调整比较有用。但其实时荧光的仪器刚进入中国不久,具体如何还不得而知。关于选购,根据单位情况而定,由于PCR的技术含量其实并不高,好的国产仪器如杭州博日(与日本著名厂商大和有关)也差不太多。关于进口仪器,罗氏的仪器不错,但如果标本量大,建议不要用罗氏。一则会累死的。另外,每个标本要分摊的标准曲线、对照成本太高。同时,试剂也比较受限。
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  • wccd1

    第2楼2012/01/17

    谢谢分享,不太了解PCR。

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  • yuduoling

    第3楼2012/01/17

    了解一下,平常用的不多。

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  • diligentlady

    第4楼2012/06/29

    伯乐的也不错啊

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