用在线过滤器和保护柱维护色谱柱

主题：【求助】【原创】保护柱与在线过滤器的异同、使用和维护

http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20091013/2154804/


在连接保护柱时，应注意以下两点：
1、peek管在插入保护柱时，应插到最深处，直到不能再深为止，以防止在此处发生漏液；
2、保护柱芯装好以后，把两端的卡套用手拧紧后，应该用小扳手再进一步拧紧，以防止此处漏液。

2. 在线过滤器跟保护柱的异同
相同之处：
1）两者都有卡套；
2）两者所接的位置相同，都是接在色谱柱前面，紧挨着色谱柱；
3）两者都有筛板，防止固体颗粒物质到达色谱柱，堵塞色谱柱筛板；
不同之处：
1）保护柱的卡套中放置的是保护柱芯，柱芯内含有填料。这些填料的存在可以拦截样品中的一些强保留、强酸性和强碱性物质，防止它们对色谱柱内填料的污染和损坏。因此使用保护柱，可以对色谱柱进行全方位的保护，是保护色谱柱最佳的方式。保护柱的使用有一个缺点就是，填料类型相匹配的要求比较高，通常柱芯的填料需要和色谱柱内的填料相同，如果不同，有可能对分析造成干扰。需要注意的是，保护柱只能对样品中含有的少量的污染物起防护作用，对流动相中pH的超标等并不能够起到很好的保护作用，因为流动相的用量太大了，保护柱不能完全阻止污染物到达色谱柱，超过了它的保护限度。
2）在线过滤器只有一个筛板，它的功能比较单一。只能防止固体颗粒物质到达色谱柱。但是它有一些很显著的优点是：i）可以与所有的不同厂家的柱子一起使用；ii）一次性购买长时间使用、甚至永久性使用；

3. 保护柱的维护方法
1）保护柱的更换时机：通常柱压太高、柱效下降或分离度下降等影响分离的因素出现时就应该考虑更换保护柱。
2）保护柱的使用和维护：
I）一个新的保护柱芯是没有方向的，但是从第一次使用时开始保护柱芯
就赋予了方向，因为固体颗粒物质和强保留物质总是从入口端到达保
护柱，并在这一端开始累积。所以柱芯在开始使用后应确认好方向。
II）当发现分析过程出现柱压太高、柱效下降或分离度下降等影响分离的因素的时候，需要对保护柱进行一下维护。维护的方法如下：
a）在柱套上做好标记，确认保护柱芯的正反方向；取下保护柱，在不打开卡套的前提下将保护柱反接（注意此时不能接色谱柱），用甲醇：水＝20：80 以3ml/min流速冲洗10min，然后再用纯甲醇以3ml/min流速冲洗10min；
II）冲洗好后将保护柱正接，打开泵除去保护柱和连接管内的空气，再连接好色谱柱，象往常一样使用。

4. 在线过滤器的维护：
如果出现柱压高的情况，有可能是固体颗粒物质堵塞了在线过滤器的
筛板，需要清洗筛板。具体如下：
打开在线过滤器卡套，取下筛板，分别用水和甲醇各超声10min，然
后放回卡套，如往常一样使用。

目前我们只用在线过滤器，没有用保护住呢

保护柱

定义　　高效液相色谱仪中，安装在进样器和分析柱之间，通过流动相和样品溶液。

作用

　　 预先捕集能被分析柱牢固吸附，不能被流动相所洗涤的物质，保护并延长分析柱使用寿命。

其它

填料

　　 保护柱的填料一般和分析柱相同。

长度

　　 保护柱的长度一般只有1-2cm。

清洗

　　 保护柱在清洗时首先要拆下分析柱，以免洗脱物进入分析柱；然后选择适当的流动相进行冲洗。

怎样选择保护柱，但又不影响分离分析？

通常，在选择保护柱之前首先要考虑的是样品是否清洁，对于大部分分析工作者来说，一只1cm长的保护柱便能提供充分的保护作用。但是，如果样品非常不清洁，或工作中发现经常要更换1cm的保护柱，那么就应该选用2cm或3cm的保护柱，保护柱越长自然所装填的色谱填料就越多，则其保护性能越好，当然随着保护柱长度的增加，样品的保留时间也相应增加，一般来说，保护柱的内径与分析色谱柱的内径相同或相当即可。

保护柱的填料装填方式也很重要，目前有薄膜装填法的保护柱，使用过程简单方便，而且可以在实验室中进行干装。但是，其最大的缺点是不经济，特别是针对中国的具体情况，一次性使用相对费用较高。另外，薄膜装填法的保护柱所装填的色谱填料有限，只能提供很有限的保护作用；不过也因为所装填的色谱填料较少，保护柱的长度也较短，所以对分析样品的保留时间的影响也很小。

另一种保护柱结构其实质是缩短了色谱分析柱，设计方式上有直连式/手紧式或整体式。

整体式设计是由色谱柱的生产厂商直接安装在色谱分析柱上的，必须与色谱分析柱一同订货，可以非常方便的使用，但不能被修改。

直连式结构设计可以在任何时候由色谱工作者来安装连接，可以与任何品牌的色谱柱连接使用，而且可以根据不同的样品选择合适的保护柱长度。

手紧式保护柱从结构上讲是与直连式保护柱一样，只是在连接时不用借助扳手等工具，直接用手上紧即可。另外从保护柱结构的角度看，保护柱结构又分为是否可以更换保护柱柱芯，现在大多数的保护柱均可以更换柱芯，可以降低保护柱的使用成本。

大多数人是根据色谱分析柱的填料来选择保护柱的填料，正常情况下可以选择与分析色谱柱一样的色谱填料。但是，根据实际的分析工作，也可不必与分析色谱柱的填料完全匹配。

对于选择保护柱的原则是：在满足分离分析要求的前提条件下，尽可能的选择较短的保护柱，尽可能选择对分离样品小一些保留性的填料。

填料 保护柱的填料一般和分析柱相同？
有的老师说，保护柱填料粒径可以更大一些

保护柱的选择原则有：
1 保护柱子的填料要和您的柱子的填料一致，才不会影响 以后的柱子上的分离.
2 注意您流动相的PH范围，要在您的保护柱的耐受范围内。以免损坏柱子。