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省部重点实验室
第1楼2012/03/15
没有预柱吗?做生物样品最好用预柱. 方法一、用水-乙腈-50%的异丙醇-乙腈-水冲冲方法二、用磷酸盐缓冲液:乙腈(50:50)在约40度条件下反洗色谱柱用黏度大的溶剂冲洗柱子多用预柱比较好经常更换预柱,因为大多数的生物样品堵塞柱子的影响是不可逆转的 我建议用以下的方法再生色谱柱:1 首先将柱子反方向接好2 然后按照水-甲醇-异丙醇-二氯甲烷-异丙醇-甲醇-水的顺序各冲10min3 正接色谱柱,用流动相平衡注意:方法中所用流动相为色谱纯。 可以在冲洗过程中开适当的柱温。试试吧!
第2楼2012/03/15
另外还需要注意:不能随便反冲哦,有些柱子是不能反冲的!先看看柱子的说明书在决定!纯水冲柱也是要很谨慎的!不知你用的是什么柱子?我的反相柱是先用10%乙腈冲0.6ml/min 20min,再用100%乙腈0.8ml/min 冲15分钟,最后用50-60%乙腈0.8ml/min 冲洗20min.每天进完样都要保养哦!不要怕麻烦.这样对柱子很有用的!如嫌乙腈贵也可用甲醇代替!
dahua1981
第3楼2012/03/15
一看您就很有这方面的经验
happy爱米粒
第4楼2012/03/15
呵呵,应该是保护住哦,跟预柱概念是不一样的
第5楼2012/03/15
现在很多C18柱子都可以耐受100%的水,不过为了安全,还是不要超过90%水相。反冲当然是不建议的,那是破釜沉舟的选择
第6楼2012/03/15
大部分情况甲醇是可以替代乙腈的,而且长期使用乙腈有可能对设备某些部件或管路造成侵蚀。但是两种溶剂选择性不同,乙腈还是必要的,应该备用
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