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迪马资料:生物样品污染的柱子的清洗方法

  • happy爱米粒
    2012/03/12
  • 私聊

厂商论坛

  • 生物样品污染的柱子的清洗方法


    G1%的乙酸水溶液

    G1%的三氟乙酸水溶液

    G0.1%四氢呋喃/正丙醇= 40/60(需降低流速)

    G三乙胺/正丙醇= 40/60(混合前用磷酸调pH2.5

    G或者:将色谱柱反转,与检测器断开,用5倍柱体积的100%异丙醇清洗,然后使用3~5倍柱体积的二氯甲烷,3~5倍柱体积的异丙醇,最后再返回原始的溶剂体系
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  • 省部重点实验室

    第1楼2012/03/15

    没有预柱吗?做生物样品最好用预柱.

    方法一、用水-乙腈-50%的异丙醇-乙腈-水冲冲

    方法二、用磷酸盐缓冲液:乙腈(50:50)在约40度条件下反洗色谱柱

    用黏度大的溶剂冲洗柱子
    多用预柱比较好
    经常更换预柱,因为大多数的生物样品堵塞柱子的影响是不可逆转的

    我建议用以下的方法再生色谱柱:
    1 首先将柱子反方向接好
    2 然后按照水-甲醇-异丙醇-二氯甲烷-异丙醇-甲醇-水的顺序各冲10min
    3 正接色谱柱,用流动相平衡
    注意:方法中所用流动相为色谱纯。
    可以在冲洗过程中开适当的柱温。
    试试吧!

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  • 省部重点实验室

    第2楼2012/03/15

    另外还需要注意:
    不能随便反冲哦,有些柱子是不能反冲的!
    先看看柱子的说明书在决定!
    纯水冲柱也是要很谨慎的!不知你用的是什么柱子?

    我的反相柱是先用10%乙腈冲0.6ml/min 20min,再用100%乙腈0.8ml/min 冲15分钟,最后用50-60%乙腈0.8ml/min 冲洗20min.

    每天进完样都要保养哦!不要怕麻烦.这样对柱子很有用的!
    如嫌乙腈贵也可用甲醇代替!

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  • dahua1981

    第3楼2012/03/15

    应助达人

    一看您就很有这方面的经验

    省部重点实验室(gl19860312) 发表:另外还需要注意:
    不能随便反冲哦,有些柱子是不能反冲的!
    先看看柱子的说明书在决定!
    纯水冲柱也是要很谨慎的!不知你用的是什么柱子?

    我的反相柱是先用10%乙腈冲0.6ml/min 20min,再用100%乙腈0.8ml/min 冲15分钟,最后用50-60%乙腈0.8ml/min 冲洗20min.

    每天进完样都要保养哦!不要怕麻烦.这样对柱子很有用的!
    如嫌乙腈贵也可用甲醇代替!

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  • happy爱米粒

    第4楼2012/03/15

    呵呵,应该是保护住哦,跟预柱概念是不一样的

    省部重点实验室(gl19860312) 发表:没有预柱吗?做生物样品最好用预柱.

    方法一、用水-乙腈-50%的异丙醇-乙腈-水冲冲

    方法二、用磷酸盐缓冲液:乙腈(50:50)在约40度条件下反洗色谱柱

    用黏度大的溶剂冲洗柱子
    多用预柱比较好
    经常更换预柱,因为大多数的生物样品堵塞柱子的影响是不可逆转的

    我建议用以下的方法再生色谱柱:
    1 首先将柱子反方向接好
    2 然后按照水-甲醇-异丙醇-二氯甲烷-异丙醇-甲醇-水的顺序各冲10min
    3 正接色谱柱,用流动相平衡
    注意:方法中所用流动相为色谱纯。
    可以在冲洗过程中开适当的柱温。
    试试吧!

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  • happy爱米粒

    第5楼2012/03/15

    现在很多C18柱子都可以耐受100%的水,不过为了安全,还是不要超过90%水相。

    反冲当然是不建议的,那是破釜沉舟的选择

    省部重点实验室(gl19860312) 发表:另外还需要注意:
    不能随便反冲哦,有些柱子是不能反冲的!
    先看看柱子的说明书在决定!
    纯水冲柱也是要很谨慎的!不知你用的是什么柱子?

    我的反相柱是先用10%乙腈冲0.6ml/min 20min,再用100%乙腈0.8ml/min 冲15分钟,最后用50-60%乙腈0.8ml/min 冲洗20min.

    每天进完样都要保养哦!不要怕麻烦.这样对柱子很有用的!
    如嫌乙腈贵也可用甲醇代替!

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  • happy爱米粒

    第6楼2012/03/15

    大部分情况甲醇是可以替代乙腈的,而且长期使用乙腈有可能对设备某些部件或管路造成侵蚀。但是两种溶剂选择性不同,乙腈还是必要的,应该备用

    省部重点实验室(gl19860312) 发表:另外还需要注意:
    不能随便反冲哦,有些柱子是不能反冲的!
    先看看柱子的说明书在决定!
    纯水冲柱也是要很谨慎的!不知你用的是什么柱子?

    我的反相柱是先用10%乙腈冲0.6ml/min 20min,再用100%乙腈0.8ml/min 冲15分钟,最后用50-60%乙腈0.8ml/min 冲洗20min.

    每天进完样都要保养哦!不要怕麻烦.这样对柱子很有用的!
    如嫌乙腈贵也可用甲醇代替!

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