各位老师帮忙看下 水性柱GPC 为什么出峰只有两个？

最上面图是PEG10000和PEG6000 ，HO-PEG24-OH混合，中间为PEG6000，最后图为PEG10000，都是多分散的

应助达人

20分钟出来的峰是溶剂峰，你样品不是用的流动相配置的吧？
分析PEG可以就用纯水流动相也可以很好分析，只是你选择的柱子必须能耐纯水的，而且要加盐。

应助达人

楼主用的是什么柱子？分析的极限是多少分子量的？
看了你的图发现一个问题，你说第一个图是6000和10000的混合样品，但出峰三个，按照你后面两个谱图，判断第一个是峰是6000和10000两个物质峰的叠加，所以峰尖时间也算正常。问题是第二峰在16min，是什么物质呢？不明白了。

谢谢小不董的热心回答，回去看了下第一个图，是我截图错了，这个是6000和10000还有另一个H0-PEG24-OH 混合后进样的图。
我的柱子是agilent 的 PL aquagel-OH 5um 20, 300*7.5mm MW Range 100 to 10000.耐纯水的,两根串联。
有几个问题想请教下：
1，样品我是用流动相配制的，为什么能确定20min出来的是溶剂峰呢？
2，我要分析的是PEG系列的多分散聚合物，如果用纯水一般加什么盐，加多少比较好呢？
3，多分散的样品，以我的理解应该会出一系列正态分布的峰吧，为什么只出一个啊？谢谢了

应助达人

由于你的柱子的range是100to10000,所以在分离6000,10000不是很好，10000已经是他的分析极限了，但能把6000和HO-PEG24-OH分离得很好，所以建议你可以考虑使用PL aquagel-OH 30 10um,300*25mm的柱子，他分析极限是100-30000。part no; 1220-6130。
你使用的这个柱子和我推荐的这个柱子都可以用纯水，你只分析PEG的话，可以不加缓冲盐都可以，但如果你分析含有anionic阴离子的高分子，要价0.1-0.3M NaNO3 和pH=7-9 0.01M NaH2PO4，若含有cationic阳离子的，建议使用0.2-0.8M NaNO3 和pH=2-7 0.01M NaH2PO4，也都可以再加甲醇最多到50%比率的水溶液做流动相。

嗯，非常感谢，我们这分子量一万以上测得比较少的。下次我用你的方法试试做下！

应助达人

不过你这个柱子分析1万以下的高分子是很好的。

您好，借此宝地咨询一下，我最近在做水相的GPC，需要测试阴离子和阳离子型高分子的分子量。想请教一下，对于阴离子加入0.1-0.3M的NaNO3是为了屏蔽电荷吧？用0.01M NaH2PO4 调节pH到7-9也是为了去质子化减少电荷量吧？那么为什么阳离子型的需要更高的离子强度来屏蔽电荷呢？像季铵盐类的水性高分子，为什么也要调节pH值呢？后面加入甲醇（我看到也有加乙腈之类的）的目的是什么呢？十分期待您的答复！！！万分感谢！！！

应助达人

不好意思， 我写错了，误导了你，含有阳离子的用pH=2-7的0.01M NaH2PO4来调节。目的是为了都是为了减小化学键的作用，让高分子有机物能自由穿过柱子，只受到体积排阻的作用。加甲醇的目的或作用有两个，一个是抑制细菌的生长，一个也是减小化学键的作用。