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第2楼2012/10/08
112.3HPLC测定钝果寄生属3种植物中槲皮素的含量
作者: 刘航(四川省乐山食品药品检验所,四川乐山614000)
摘要: 目的:建立高效液相色谱法测定钝果寄生属3种植物中槲皮素含量的方法。方法:采用高效液相色谱法,Diamonsil C18(250mm×4.6mm,4μm);流动相为甲醇-水-冰醋酸(55:45:1.8),检测波长为370nm,柱温为35℃,流速为1.0ml/min。结果:槲皮素在0.02763-2.21μg/ml浓度范围内线性关系良好。平均回收率为102.1%(RSO=2.31%)。结论:本法简单、准确,重复性好,可用于钝果寄生属药材的质量控制。
谱图:
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第3楼2012/10/08
112.4RP-HPLC测定板蓝根颗粒中靛玉红的含量
作者: 吴泽鹏(广东食品药品职业学院,广东广州510520)
摘要: 目的:建立板蓝根颗粒中靛玉红的含量测定方法,为板蓝根颗粒的质量标准控制提供理论依据。方法:采用LC—10ATvp高效液相色谱仪,色谱柱:Diamonsil C18柱(4.6min×250mm,10μm);流动相:甲醇:0.2%醋酸溶液(73:27);流速:1.0ml/min;检测波长:289nm;柱温:25℃;进样量:20μ1。结果:靛玉红进样量在5.28-26.40μg范围内与峰面积呈良好线性关系,R=0.9935;平均回收率为100.67%,RSD=1.31%。结论:本实验所建立的方法专属性强,准确度高,重现性好,可作为板蓝根颗粒的质量控制方法。
谱图:无
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第5楼2012/10/08
112.6 香砂养胃丸中厚朴酚与和厚朴酚的提取及测定
作者: 姜宁[1,2] 刘晓鹏[3] 李翠霞[1]( [1]上海万兴生物制药有限公司,上海201206 [2]湖北民族学院生物科学与技术学院,湖北恩施445000 [3]生物资源保护与利用湖北省重点实验室,湖北恩施445000)
摘要: 目的:快速提取及测定香砂养胃丸中厚朴酚及和厚朴酚。方法:用ASE300型快速溶剂萃取系统进行快速萃取香砂养胃丸中厚朴酚及和厚朴酚,利用反相高效液相色谱法测定厚朴酚及和厚朴酚的含量,Diamonsil(TM)C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相:甲醇-水-冰醋酸(79:21:0.25),流速:1.0mL/min,检测波长:294nm,柱温:23℃,结果:HPLC法测得在范围内呈良好线性关系,和厚朴酚的平均回收率为100.89%,RSD为1.41%;厚朴酚的平均回收率为99.83%,RSD为1.61%。结论:本方法简便、准确、专属性强,能有效地控制香砂养胃丸的质量。
谱图:
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第6楼2012/10/08
112.7HPLC法测定人血浆中替硝唑的浓度
作者: 常馨予[1,2] 夏东亚[1] 郭涛[1]( [1]沈阳军区总医院药剂科,沈阳110016 [2]沈阳药科大学临床药学教研室,沈阳110015)
摘要: 目的建立测定人血浆中替硝唑浓度的HPLC法。方法采用Diamomil C18(200 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相为乙腈-水(20:80,V/V);流速1.0 mL·min^-1;检测波长310 nm;内标为甲硝唑。结果替硝唑血药浓度在0.5~50mg·L^-1内线性关系良好(r=0.9990);替硝唑低、中、高3种浓度的方法回收率为94.89%~99.53%,提取回收率为89.55%~95.60%,日内RSD〈2%(n=5),日间RSD〈5%(n=5)。结论本方法操作简便,准确可靠,可用于替硝唑临床血药浓度监测和药动学研究。
谱图:
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第7楼2012/10/08
112.8HPLC法测定63名肾移植患者环孢素的全血浓度
作者: 秦海旭 郭涛 夏东亚(沈阳军区总医院药剂科,沈阳110016)
摘要: 目的建立测定全血中环孢素(CsA)浓度的HPLC方法。方法全血样品1mL,乙醚提取,正己烷洗涤去干扰后采用Diamonsil C18柱(200mm×4.6mm,5μm)分离;流动相为乙腈-甲醇-水-异丙醇(58:24:17:1,V/V);流速1.0mL·min^-1;柱温65℃;检测波长210m;环孢素D为内标。结果CsA全血质量浓度为50-2500μg·L^-1时线性关系良好(r=0.9951)。方法回收率91.43%~96.48%,萃取回收率75.87%~84.96%,日内RSD〈6.65%(n=5),日间RSD〈7.86%(n=5)。结论本方法较简便,准确可靠,可用于CsA药动学研究。
谱图:
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第8楼2012/10/08
112.9HPLC法测定人血浆中奥美拉唑浓度
作者: 刘玉波 郭涛 隋因 周袆(沈阳军区总医院药剂科,沈阳110016)
摘要: 目的建立人血浆中奥美拉唑的HPLC测定方法,并对奥美拉唑在健康志愿者体内进行药动学研究。方法采用内标法。以乙醚进行提取。提取液吹干。残渣用甲醇溶解后进行HPLC法检测;色谱柱为Diamomil C18(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-乙酸胺缓冲液(58:42。V/V)。其中缓冲液组成为水-醋酸-三乙胺(98:1:1,V/V),流速1.0mL·min^-1。检测波长302nm。测定了24名健康志愿者单剂量口服40mg奥美拉唑胶囊后不同时刻奥美拉唑血药浓度。并采用DAS软件对其体内药动学参数进行估算。结果本测定方法的方法回收率为98.34%-105.87%,线性范围为10-2000μ·L^-1.24名健康志愿者体内药动学采用统计矩分析,tmax为(2.11±0.73)h,t1/2为(1.03±0.56)h,ρmax(776.30±341.55)μg·L^-1,MRT0→1为(3.04±0.80)h,AUC0→12为(1749.90±1241.73) μg·h·L^-1,AUC0→∞为(1790.48±1309.45)μ·h·L^-1。结论本方法灵敏度高,重现性好,专属性强,适合临床药动学研究。
谱图:
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第9楼2012/10/08
112.10 细菌性肺炎患者万古霉素持续静滴的PK/PD研究
作者: 李昕 (中南大学)
摘要: 一、目的: 探讨细菌性肺炎患者接受万古霉素持续静脉滴注时Cmin(或Css)/MIC与临床疗效的关系,并观察国内细菌性肺炎患者万古霉素血药谷浓度超过10mg·L-1时肾毒性的发生情况。 二、方法: (一)RP-HPLC法测定万古霉素的血浆浓度 以去甲万古霉素为内标。取血样1.0mL,用0.35 mL10%的高氯酸进行蛋白沉淀,取上清液用二氯甲烷2.0mL提取去杂质,取水层20μL,在色谱条件下进样。色谱条件:Diamonsil C18柱(250×4.6mm,5μm),柱温30℃,流动相为乙腈-0.05mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(9.5:90.5,pH=3.0),流速为1.0mL·min-1,检测波长为紫外230nm。 (二)万古霉素治疗细菌性肺炎患者时血药谷浓度与肾毒性相关性研究 1.病例的选择: 怀疑或确认耐甲氧西林葡萄球菌(methicillinresistant Staphylococcus,MRS)属的肺部感染并经临床医师确认需使用万古霉素的患者,年龄>18周岁。 2.方法: 患者接受0.5g,q8h或1g,q12h静脉滴注(每次静滴时间>1h)的给药方案,在开始治疗4个剂量后下次给药前用HPLC法进行万古霉素谷浓度(Cmin)的测定。此后每隔48小时对Cmin进行复测,患者的平均Cmin为治疗期间所测得的Cmin之和除以测定次数。按平均Cmin水平的不同分为两个组: A组(Cmin>15mg·L-1);B组(10 mg·L-1< Cmin≤15 mg·L-1)。在用药前至停药后第3天内测定患者的肾功能(血肌酐值和血尿素氮值)。 (三)耐甲氧西林葡萄球菌性肺炎患者万古霉素持续静滴的PK/PD研究 1.病例的选择: 经病原学和临床诊断确诊为MRS肺炎,并经临床医师认可需要使用万古霉素的患者,年龄>18周岁。 2.方法: 所有入选患者分为A、B两组,A组给药方案为:0.5g,q8h或1g,q12h,持续3小时静脉滴注;B组给药方案为:所有患者均先接受0.5g负荷剂量1小时静脉滴注,然后根据患者用药前肾功能情况确定一天总剂量,将一天总剂量持续24小时静脉滴注。A组患者在开始治疗4个剂量后进行万古霉素Cmin的测定,B组患者从用药24h后开始抽血进行坪浓度(Css)的测定,此后每隔48小时对Cmin(或Css)进行复测,患者的平均Cmin(或Css)为治疗期间所测得的Cmin(或Css)之和除以测定次数。采用琼脂稀释法对患者下呼吸道标本中分离出的MRS进行万古霉素的MIC测定。计算平均Cmin(或Css)/MIC,并观察平均Cmin(或Css)/MIC与患者MRS的清除情况及临床疗效之间的相关性。 三、结果: (一)RP-HPLC法测定万古霉素的血浆浓度 在本实验条件下,万古霉素与内标物去甲万古霉素的色谱峰形好,且能较好地分离。在2.07~132.64 mg·L-1的范围内,万古霉素浓度(X)与万古霉素和去甲万古霉素峰面积之比(Y)呈良好线性关系,回归方程为Y=0.005+0.026X,r=0.9997。平均绝对回收率大于68%,平均方法回收率在97.85%~100.05%之间,日内和日间RSD均小于10%。 (二)万古霉素治疗细菌性肺炎患者时血药谷浓度与肾毒性相关性研究 53例患者中共有5例(9.4%)发生肾毒性,其中A组4例(16.0%),B组1例(3.6%)。X2检验结果显示两组间肾毒性的发生率无统计学意义(p=0.283)。 与用药前相比,A组患者用药后血肌酐值有明显上升(P=0.006),内生肌酐清除率有明显下降(P=0.014);B组用药前后肾功指标均无明显变化(P=0.276; P=0.750;)。与B组相比,A组用药前后内生肌酐清除率下降得更多,具有统计学意义(P=0.044)。 直线回归分析结果显示,A组谷浓度与内生肌酐清除率及血肌酐值的变化均有线性相关性(P=0.005、Pearson相关系数为-0.648;P=0.001、Pearson相关系数为0.716),与血尿素氮/血肌酐的变化无线性相关(P=0.181);B组谷浓度与肾功能指标的变化均无线性相关性(P=0.778; P=0.977; P=0.977)。 (三)耐甲氧西林葡萄球菌性肺炎患者万古霉素持续静滴的PK/PD研究 A组死亡率为16.660%,B组死亡率为0%,两组间无统计学差异。A、B两组治疗的初始有效率分别为50.00%和84.21%,第5d细菌的清除率分别为20.00%和52.63%,均具有统计学差异(P=0.016,P=0.036)。A、B两组间Cmin(或Css)、Cmin(或Css)/MIC均具有统计学差异(P<0.001; P=0.015),两组间万古霉素对MRS的MIC值及疗程均无统计学差异。 49例患者中,除A组5例死亡外,其余44例均取得了治疗终末的有效。死亡组的Cmin为14.76±2.75mg·L-1,Cmin/MIC为8.52±1.91;A组中治疗终末有效者的Cmin为16.23±2.95 mg·L-1,Cmin/MIC为19.73±9.25;所有治疗终末有效者的Cmin为18.05±3.51mg·L-1,Cmin(或Css)/MIC为22.10±10.31。A组中,死亡者与非死亡者的Cmin无统计学差别(P=0.314),但两者间Cmin/MIC值具有显著的统计学差别(P=0.013)。所有入选病例中,死亡者与非死亡者的Cmin(或Css)及Cmin(或Css)/MIC均有统计学差别(P=0.049; P=0.005)。 所有患者中,初始治疗有效与初始治疗无效者间的Cmin(或Css)分别为17.81±3.60mg·L-1和17.58±3.58 mg·L-1,两者间无统计学差别(P=0.833);但初始治疗有效者的Cmin(或Css)/MIC明显高于初始治疗无效者(分别为26.64±9.13和11.12±3.14,P<0.001)。MRS在第5d达到完全清除者与第5d未清除者的Cmin(或Css)分别为18.63±3.67 mg·L-1和17.26±3.46mg·L-1,两者无统计学差别(P=0.200); Cmin(或Css)/MIC分别为31.75±6.75和15.07±7.22,两者间有显著的统计学差别(P<0.001)。 Cmin(或Css)/MIC与死亡率、治疗的初始有效、MRS的清除时间及治疗第5d时MRS的清除均有相关性(P=0.010,Spearman相关系数为-0.478; P<0.001,Spearman相关系数为0.767; P=0.023,Spearman相关系数为-0.321; P<0.001,Spearman相关系数为0.727)。 当Cmin(或Css)/MIC≥12时,发生死亡的风险性会显著降低(P=0.001,OR=0.643,95%CI:0.435~0.950);当Cmin(或Css)/MIC≥15时,治疗的初始有效率会明显升高(P<0.001,OR=27.733,95%CI:5.822~132.106);当Cmin(或Css)/MIC≥25时,MRS第5d的清除率会明显升高(P<0.001,OR=17.400,95%CI:3.973~76.201)。 四、讨论与结论: 1.本研究建立的万古霉素血药浓度测定的HPLC法准确、方便、经济、无杂质干扰,适用于万古霉素血药浓度监测及药动学研究。 2.本研究首次报道了万古霉素Cmin超过10mg·L-1时对中国细菌性肺炎患者肾功能的影响。对于中国细菌性肺炎患者,当万古霉素谷浓度在10~15mg·L-1范围内时,万古霉素对肾功能基本无影响,但当谷浓度超过15mg·L-1时,万古霉素能引起肾功能的明显下降。 3.本研究首次报道了Cmin(或Css)/MIC可作为预测万古霉素持续静滴治疗MRS肺炎的一个疗效指标。Cmin(或Css)/MIC≥12,能明显降低患者的死亡风险; Cmin(或Css)/MIC≥15,治疗的初始有效性会明显升高;Cmin(或Css)/MIC≥25,MRS在5d内完全清除的可能性较大。 4.对于MIC值≤1的MRS肺炎,不必要选用24h持续静滴给药的方案。但是对于MIC值>1的MRS肺炎,选用24小时持续静滴的给药方式可能更为合理。 5.在治疗MRS肺炎的危重病人时,采用24h持续静滴的给药方案,可能更有利于感染的快速有效控制,从而降低危重患者的死亡风险。 6.对于24h持续静滴的患者,其AUC24/MIC≥288就可获得较高的细菌清除及较低的死亡风险。AUC24/MIC≥400并不能准确地预测持续静滴给药方案下万古霉素的疗效,Cmin(或Css)/MIC应是一个相对于AUC24/MIC而言更加合理的PK/PD参数。
谱图: