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谁来为我解惑

紫外可见分光光度计(UV)

  • 昨天修理一台分光光度计,发现了一个有趣的现象,见下面的测量结果的拷贝


    说 明:
    (1)仪器扫描范围为紫外区域,并采用多波长测量方法,即定点测量方法。波长的选择为六个点,分别是250,240,230,220,210,和200nm处。
    (2)首先仪器的样品室内任何物品均不放置,然后做用户基线校正。
    (3)然后分别测量空气,空的比色池和盛有去离子水的比色池,其测试结果如上面的记录所示。
    问 题:
    为何盛有水的比色池的吸光值却比空池子的吸光度还要小?经过反复测量,结果一样,感到很困惑。
    欢迎大家实践并讨论。
    (备注:两种测量方法均使用同一个比色池)
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  • tutm

    第1楼2012/10/13

    这个现象我与祥子去年或前年就已经讨论过了。

    这个问题是正常的,应该是界面反射所致。就是折光率相差越大界面反射越强,加了水后,界面两边的折光率差异减小,界面反射程度下降,由此使得加水后透光率提高了。

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  • tutm

    第2楼2012/10/13

    请安老师看下这个讨论,有关你说的情况分析和计算
    http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101117/2932956/

    另外好像还有当时的同一问题讨论,不过找不到了。

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  • 夕阳

    第3楼2012/10/13

    应助达人

    我还真没有注意过这个讨论啊!

    tutm(tutm) 发表:这个现象我与祥子去年或前年就已经讨论过了。

    这个问题是正常的,应该是界面反射所致。就是折光率相差越大界面反射越强,加了水后,界面两边的折光率差异减小,界面反射程度下降,由此使得加水后透光率提高了。

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  • 夕阳

    第4楼2012/10/13

    应助达人

    谢谢!我仔细学习学习。

    tutm(tutm) 发表:请安老师看下这个讨论,有关你说的情况分析和计算
    http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101117/2932956/

    另外好像还有当时的同一问题讨论,不过找不到了。

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  • yanyanrenren

    第5楼2012/10/13

    200nm?安老师使用这么低的波长?会不会和远紫外被空气吸收有关?

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  • 夕阳

    第6楼2012/10/13

    应助达人

    呵呵,不是我使用啊。之所以使用这么短的波长主要是因为所测的蛋白样品的出峰在200nm之故。
    其实一般的紫外可见分光光度计的使用波长均在190nm-1100nm范围,这个200nm的位置也不算是什么远紫外范畴。

    yanyanrenren(yanyanrenren) 发表:200nm?安老师使用这么低的波长?会不会和远紫外被空气吸收有关?

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  • 悠旸

    第7楼2012/10/13

    还不至于,低于190nm才算深紫外(或称真空紫外),低于190nm如果不用抽真空或惰性气体吹扫的方法影响会很大,而200nm以上几乎不用考虑这个问题。

    yanyanrenren(yanyanrenren) 发表:200nm?安老师使用这么低的波长?会不会和远紫外被空气吸收有关?

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  • 悠旸

    第8楼2012/10/13

    原来是这样,学习了。

    tutm(tutm) 发表:这个现象我与祥子去年或前年就已经讨论过了。

    这个问题是正常的,应该是界面反射所致。就是折光率相差越大界面反射越强,加了水后,界面两边的折光率差异减小,界面反射程度下降,由此使得加水后透光率提高了。

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  • 朝阳

    第9楼2012/10/13

    有点意思,哪天我也试试,是不是所有仪器都有这个现象。

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  • ldgfive

    第10楼2012/10/14

    应助工程师

    这个可能与光的折射有关

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