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测卡那霉素遇到瓶颈。急求大神帮助。

muwensj

2012/10/18

离子色谱（IC）

本人遇到了很难的一个问题，不知有没有人做过这方面的，急求赐教。
仪器为ICS-5000，柱子为CarboPac MA1，检测器脉冲安培检测。待测物质为某表达蛋白里的卡那霉素残余

！
目前标准曲线建立好了，但是样品处理遇到困难。蛋白不能进柱子，会对柱子造成不可逆转的损坏（柱效

降低），为了除去蛋白使用了下列方法，但无效。
方法一 3K的膜过滤以除去分子量为6oooo多的蛋白，但是Lowry法检测发现流穿里蛋白浓度仍有十几

ug/ml，这个浓度仍不适合上样。
方法二，水解蛋白为氨基酸后，分析柱前加氨基酸捕获柱。但发现卡那霉素在我们的水解条件下会降解。

这样检测就没有意义了，还是舍弃。注：卡那霉素在0.5N HCl 100度 1h即水解，我们的条件比这还要激

烈，否则不能完全水解蛋白为氨基酸。

请大家讨论讨论，给些建议。谢谢。

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