胡萝卜素的测定

用流动相超声 样品的峰面积只有200左右，用三氯甲烷乙腈 定容时峰面积 达到500左右

这个B-胡萝卜素跟哪种溶剂的溶解性较好啊？

正常来说 三氯甲烷中能溶 但 实际样品 不是存物质 可能会干捞溶解

从苯-甲醇中结晶得到β-胡萝卜素为深紫红色六方棱柱结晶，从石油醚中得到的是红色正方形叶片晶体。熔点181～182℃。溶于二硫化碳、苯、氯仿，略溶于乙醚、石油醚、已烷及植物油，微溶于甲醇、乙醇。不溶于水、酸、碱。稀溶液显黄色。β-胡萝卜素对空气、热、光敏感，在溶液中格外敏感。在空气中易氧化变为无色、无活性的氧化产物。
维生A1的环结构与β-胡萝卜素的两个环结构相同，因此一份子β-胡萝卜素可以加水断裂为2分子的维生素A1。

[2,3,5]

胡萝卜素是具有类似维生素A的生物活性和效力的物质，称维生素A原。胡萝卜素常有a、b、g几种异构体，其中以b-胡萝卜素的生理效能最大。在动物的小肠内、肝脏中转化为维生素A。结构式如下：





b-胡萝卜素

由此可见，一分子的胡萝卜素可分为二分子的维生素A，在实际效能上，一分子的胡萝卜素只相当于一分子的维生素A。胡萝卜素是脂溶性物质，易氧化，对热、酸不稳定。在紫外光照射下分解。但是在惰性气体中加入适当的抗氧化剂(如维生素E)，则可提高稳定性。

b-胡萝卜素是植物色素。存在于谷物、蔬菜、水果等食物中。以每百克可食部分计，小米0.12mg、玉米0.34mg、玉米面0.13mg、黄豆0.40mg、黄豆粉0.48mg、绿豆0.22mg、毛豆0.23mg。

因b-胡萝卜素是有色色素，可采用直接比色法定量分析。

17.2.5.1 主要仪器：分光光度计，带塞烧瓶，分液漏斗，容量瓶。

17.2.5.2 试剂

1. 水饱和正丁酮：5份正丁酮与1~2份水在分液漏斗中用力地进行摇动，静置分层，取上清液备用。

2. 乙醚。

3. b-胡萝卜素标准溶液：称取0.0250g粉末状的b-胡萝卜素置于已加入乙醚的带磨口瓶塞的100mL容量瓶中，使之溶解并稀释至刻度。取出20mL置于装有水饱和正丁酮的250mL容量瓶中，定容摇匀。再从中取出25mL用水饱和正丁酮稀释至100mL，即得5mg·mL-1的b-胡萝卜素标准溶液。

17.2.5.3 方法原理

用水饱和的正丁酮萃取样品中的胡萝卜素，通过比色，求出样品中胡萝卜素含量(以b-胡萝卜素计)。

17.2.5.4 操作步骤

1. 样品的制备和测定：取10.××g研磨过的样品悬浮于装有50mL澄清的水饱和正丁酮的200mL三角瓶中(使无块状物存在)，加塞，用力振荡1min。在室温条件下暗处放置一夜。次日晨，对沉淀物再进行充分摇匀。然后在遮光条件下通过细孔折叠滤纸漏斗过滤入另一个200mL三角瓶中。过滤时，为了避免蒸发损失，漏斗颈部下端要贴紧三角瓶瓶壁，并用表玻璃盖住漏斗。吸取黄色滤液于分光光度计425nm处比色测定(注1)，并在标准曲线中查出相应的b-胡萝卜素值(A)。

2. 标准曲线的绘制：分别吸取5mg·mL-1 b-胡萝卜素标准溶液0、 0.5、 1.5、 2.0、 2.5、 3.0 mL标准液于10mL带磨口塞的容量瓶中，用水饱和正丁酮定容摇匀，得0.0，0.25，0.75，1.00，1.25，1.50mg·mL-1 b-胡萝卜素标准溶液系列。于分光光度计425nm处比色测定。然后以吸光值为纵座标，以每1mL溶液所含的b-胡萝卜素量为横座标绘制标准曲线。

17.2.5.5 结果计算

胡萝卜素含量[注2] (以b-胡萝卜素计，mg·kg-1) = r·V / m

式中：r—从标准曲线查得b-胡萝卜素的含量(mg·mL-1 )；

V—浸提液的体积(mL)；

m—样品的质量(g)。

17.2.5.6 注释

注1. 若有其它色素干扰测定，可参考鲍士旦主编， 1996，《农畜水产品品质分析》，中国农业出版社，438~442。

注2. 胡萝卜素与维生素A的换算关系为：每3mg维生素A(醇型)或3.44mg 维生素A(酯型)=10000 I.U. (国际单位)，即1I.U. 维生素A=0.6mg b-胡萝卜素=0.3mg维生素A(醇型)。

楼主能说说你的是什么样品吗？78mg/100g的数据是怎么得来的？
再，你萃取的过程中有什么保护措施没有？
样品的图谱，除了β-胡萝卜素的保留峰之外，别的杂质峰的情况怎么样呢？
上图看一下吧。

5楼的版友的这个方法楼主可以试一下 ，楼主相当于现在面临的问题是样品中的β-胡萝卜素提取不完全，你可以做一下加标回收，不同的提取溶剂导致不一样的峰面积，也有可能是提取出新的杂质，也有可能是提取更加完全，静候楼主后续的实验进程

楼主的样品基质是什么？

加标回收倒是一个不错的办法，楼主可以试试

78mg/100g 我们是根据实验室之间的比对出的一个数据，也就是别的实验室做的结果