玉米油中抗氧化剂的检测【12月版主、jhjs、zdac推荐】

houjjun

2012/11/14

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玉米油中抗氧化剂的检测

玉米油中抗氧化剂的检测

前言：本文采用全自动凝胶渗析色谱净化系统、L600 二元高压梯度高效液相色谱
系统、EV331 旋转蒸发仪建立了GPC-HPLC 检测法同时测定玉米油样品中特丁基对苯二酚（TBHQ）、
丁基羟基茴香醚（BHA）、二丁基羟基甲苯（BHT）三种抗氧化剂的分析方法。GPC 可有效去除玉米油中
油脂等大分子物质，准确收集抗氧化剂，采用HPLC-UV 检测器，准确检测玉米油中抗氧化剂含量。凝胶
净化方法简单，有效去除干扰物质，保护分析仪器；HPLC-UV 检测结果准确，具有良好的标准曲线线性、
重复性以及检测结果，该法可在18min 内完成样品中3 种物质的全部检测。

实验内容及结果：
1. 混合标准品液相色谱图、重复性和标准曲线方程
混合标准品液相色谱图、重复性和标准曲线方程

1.TBHQ 10.362' 2. BHA 12.923' 3. BHT 16.922'

图1. 混合标准品色谱图（100μ g/mL）出峰顺序依次为：TBHQ、BHA、BHT。

色谱条件：

Agela Venusil C18色谱柱；

流动相：A：甲醇，B：1%乙酸水溶液，梯度系统；

检测波长：280nm；

进样量：20μ L）,混合标准品（5 针平行）

重复性RSD 计算：

TBHQ：0.128%；BHA：0.058%；BHT：0.119%。
将浓度依次为10μ g/mL、50μ g/mL、100μ g/mL、200μ g/mL、250μ g/mL 的混合标准溶液，进样
进行液相色谱检测，建立工作曲线。

工作曲线线性方程和线性系数依次为：

TBHQ：Y=-2717+1.71×104X，R2=0.9998；

BHA：Y=3.458×104+1.777×104X，R2=0.9998；

BHT：Y=2.413×104+1.142×104X，R2=0.9997。

2. 实际样品原液中抗氧化剂含量检测和加标样品回收率计算

凝胶净化系统是根据分子体积的大小将干扰分析的大分子及小分子物质去除，同时收集待分析组分，从而达到样品净化的目的。从下图凝胶净化色谱图中分析得出：抗氧化剂的收集时间为7.5min-17min，在7.5min 前大分子物质基本流出。故全自动凝胶渗析色谱净化系统可有效去除玉米油中大分子物质对抗氧化剂的干扰。

图2. 标准品(100μg/mL)、样品原液（0.05g/mL）和加标（100μg/mL）样品经GPC净化色谱图(净化条件：溶剂：乙酸乙酯：环己烷=1:1（体积比）；流量：5mL/min；检测波长：254nm；收集范围：7.5min-17min；上样量：2mL）

各收集液（各样品均平行3次）经旋转蒸发仪浓缩后HPLC检测，得出抗氧化剂含量及回收率计算结果见下表1所示：

表1：抗氧化剂含量检测结果及回收率、重复性计算类别	样品原液平均浓度（μg/mL）	加标（100μg/mL）样品回收率范围（%）	加标（100μg/mL）样品回收率RSD（%）
TBHQ	0.3984	97.98-99.80	0.98
BHA	0	90.07-93.58	2.03
BHT	1.690	78.65-82.3	2.30