单抗CE-SDS分析结果解读

1 不认为是 case by case, 应该是固定值： 2. 如果因为氨基酸分布不均衡的原因，那也只是响应值上的差别而不应该是轻重链数目之间的差别。既然有这个怀疑你就需要确定他们的氨基酸序列，然后选用合适的定量方法（内标或者外标法）。
2 monoclonal antibody 前面的未知峰，个人认为是 反应后的副产物。如果不是你要分析的对象无需去纠结它。
3 Non-reduced就是保持它的立体结构，reduced就是破坏其三四级结构成为一级结构。至于为什么要同时比较这两者的差别，没做过，真心不懂。

non-glycosilation是否应该为non-glycosylation？

是的，我拼错了，抱歉~

学习了 最近在做CE-SDS 100ug蛋白上样 但是峰高总是很低 不知道为什么T_T

可能是你的样品中盐离子浓度有点高，在盐离子浓度高于50mM时是需要换液的。

回答你的问题:
1. 首先你确定你已经使用了迁移时间校正过的峰面积来计算百分含量.这个方法的测定波长为220nm/214nm，所有的氨基酸在这样的低波长条件下的吸收系数近似。不存在你说的那种情况。
2。HC或者Intact前面的峰，通常是由于stress条件，完整蛋白裂解的产物，例如HH, 或者HHL等。如nini斑竹所说，这样的组分峰在你的研究中无太大的实际意义。因为你采取的处理条件不同，所得到的裂解产物及含量也会不同。
3。从法规角度来说，Red是研究单抗的异质性，重点考察NG所占有的比例。而Non Red考察的可以认为是纯度相关的信息。但是由于反应条件是高温且存在其他试剂，此测定结果并非Natural状态下单抗的纯度。如果希望研究Natural条件下的纯度，请寻求合适的CZE或者MEKC方法。
4。Red时，还原剂是过量的，因此没有必要加IAM保护。Non Red时加IAM确实是为了保护可能存在的活性基团。在高温时你知道，一切皆有可能的。。。。

希望对你有所帮助。。。。

就目前来说，CESDS做单抗是研究得比较多也比较透彻的。而采用这个方法作某些其他蛋白（例如糖蛋白）时，可能会存在相互作用等某些问题。导致你的峰比较胖。

你好！我想问一下，你所说的样品离子浓度高于50 mM时需要换液。那这个50 指的是最终进样时的盐离子浓度吗？