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【许愿原创】高效液相色谱法测定柴胡药材中柴胡皂苷a、d的含量

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  • 高效液相法测定柴胡药材中柴胡皂苷a、d的含量

    概要

    柴胡为伞形科植物柴胡或狭叶柴胡的干燥根,按性状不同,分别习称“南柴胡”及“北柴胡”,其主要成分为柴胡皂苷,以柴胡皂苷a、d含量较高。

     

    实验部分

    原理

    本方法采用高效液相色谱法测定柴胡皂苷a、d的含量。以保留时间定性,峰面积定量计算。

    仪器

    高效液相色谱仪(配紫外检测器、二元高压梯度洗脱装置)

    电子天平,0.0001g

    超声波清洗器

    离心机,不低于4000r/min

    恒温水浴

    回流装置

    溶剂过滤器装置

    移液抢

    试剂

    试药 柴胡皂苷a、柴胡皂苷d对照品

    甲醇,色谱纯

    乙腈,色谱纯

    乙醇,分析纯

    石油醚,分析纯

    乙酸乙酯,分析纯

    正丁醇,分析纯

    氨水,分析纯

    超纯水或二次蒸馏水

    色谱条件

    色谱柱Venusil XBP C18(L) 色谱柱 (250×46mm,5μm)

    S/N:V9520525CK0043

    流动相:A:B=乙腈:水

    流速:1.0mL/min

    检测波长210nm

    进样量:20ul

    柱温:室温

    梯度表:

    时间(min)

    A(%)

    B(%)

    0

    25

    75

    50

    90

    10

    55

    90

    10

    56

    25

    75

    65

    25

    75

    对照品色谱图:


    按上述色谱条件对某柴胡供试品溶液测定,色谱图如下:



    博纳艾杰尔这款色谱柱做这个样品效果非常好,希望有做这个检测的同志们大胆使用。同时希望博纳艾杰尔的色谱柱越做越好,博纳艾杰尔公司的发展越来越好,我的原创也越来越好!谢谢大家,希望大家能够支持我!
  • 该帖子已被管理者-设置为精华,下面是奖励记录:
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  • houjjun

    第1楼2013/01/28

    好作品,祝愿楼主能如愿,祝愿都好,都能实现!

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  • jhjs

    第2楼2013/01/28

    多谢多谢!侯版太厉害,还请多多指教!

    houjjun(houjjun) 发表:好作品,祝愿楼主能如愿,祝愿都好,都能实现!

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  • fengmo4668

    第3楼2013/01/28

    对照品色谱图里面怎么那么多峰呢?有什么特别的说法吗?

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  • yuduoling

    第4楼2013/01/28

    后面那三个峰是什么

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  • dahua1981

    第6楼2013/01/29

    应助达人

    这么快就有许愿原创了

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  • 库特尼李

    第7楼2013/01/29

    学习了啊,大华老师。。。

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  • 库特尼李

    第8楼2013/01/29

    快过年了,祝大家新年快乐,新的一年里多多发帖交流吧。。。

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  • jhjs

    第9楼2013/01/29

    这个方法的两种分析物无论色谱柱、流动相等条件出了多大的问题,比如色谱柱柱效下降等,出峰时间都会保持在10-30分钟内,所以方法只要确保在这段时间内正常就行。那几个峰是由梯度洗脱引起的,检测波长210nm时,流动相的吸收值很大,变化时有干扰峰,只要避开就没事。另外水的纯度若不够,也有一定影响,但这个方法符合要求。当然能减少是最好的。

    fengmo4668(fengmo4668) 发表:对照品色谱图里面怎么那么多峰呢?有什么特别的说法吗?

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  • jhjs

    第10楼2013/01/29

    这个不碍事,不影响结果,主要是梯度洗脱是出的溶剂峰,也可能有水中物质的峰。这个方法正常的话25就完全结束了,即使色谱柱或流动相、流速有误差,30分钟内肯定也完成了,后面就是冲洗、平衡过程了,那就是冲洗和平衡的产物。

    yuduoling(yuduoling) 发表:后面那三个峰是什么

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