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大家用AB的仪器时,一般有机相的比例占多大?

液质联用(LCMS)

  • 请问各位战友,大家用AB的仪器时,一般有机相的比例占多大?我最近在做生物样品的定量分析时发现,有机相比例降低,药物的响应值,明显降低,峰型也变差,我做的这几个药,极性都比较大,在80%的有机相条件下,都在堆1分钟左右出峰,分不开,出峰时间太短又怕尿样基质效应不合格,一般大家都怎么解决这个问题呢?
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  • sukiliang

    第1楼2013/03/18

    这个话题不错,我没做过生物样品!帮你顶一个

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  • DeeperBlue

    第2楼2013/03/18

    应助达人

    80%有机相1分钟就全洗出来了?你没有用梯度吗?什么柱子?

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  • duyumeng

    第3楼2013/03/19

    没走梯度,我怕梯度会不稳定,C18反相柱,

    DeeperBlue(yangdeyuan) 发表:80%有机相1分钟就全洗出来了?你没有用梯度吗?什么柱子?

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  • DeeperBlue

    第4楼2013/03/19

    应助达人

    都挤在一起出峰,就要考虑用梯度。梯度走长一些。另外,我有点疑问,按你说,目标极性比较大,怎么80%有机相就全洗出来了。

    duyumeng(duyumeng) 发表:没走梯度,我怕梯度会不稳定,C18反相柱,

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  • spring0122

    第5楼2013/03/19

    个人建议还是采用梯度进行洗脱,有机相比例低可能已经导致峰展宽了,采用梯度可以既可以分离化合物、提高灵敏度又可以适当避免基质干扰,

    另,80%的有机相条件在1分钟出峰,极性还可以,比在5%有机相出峰要好办多了

    duyumeng(duyumeng) 发表:请问各位战友,大家用AB的仪器时,一般有机相的比例占多大?我最近在做生物样品的定量分析时发现,有机相比例降低,药物的响应值,明显降低,峰型也变差,我做的这几个药,极性都比较大,在80%的有机相条件下,都在堆1分钟左右出峰,分不开,出峰时间太短又怕尿样基质效应不合格,一般大家都怎么解决这个问题呢?

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  • duyumeng

    第6楼2013/03/19

    我做的是定量测定尿样中的代谢物,极性可能会比较大一点,我用的柱子是150*2.1mm,如果在1分钟出峰是不是很有可能和尿中的内源性杂质在一起出峰,导致基质效应不合格呢?

    DeeperBlue(yangdeyuan) 发表:都挤在一起出峰,就要考虑用梯度。梯度走长一些。另外,我有点疑问,按你说,目标极性比较大,怎么80%有机相就全洗出来了。

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  • duyumeng

    第7楼2013/03/19

    请问梯度洗脱提高灵敏度的原因是啥呢?

    spring0122(spring0122) 发表:个人建议还是采用梯度进行洗脱,有机相比例低可能已经导致峰展宽了,采用梯度可以既可以分离化合物、提高灵敏度又可以适当避免基质干扰,

    另,80%的有机相条件在1分钟出峰,极性还可以,比在5%有机相出峰要好办多了

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  • 小猪飞飞

    第8楼2013/03/20

    试试梯度,如果分析尿液样品,基质效应还是比较大的

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  • 八杯水

    第9楼2013/03/20

    80%的有机相太猛了,有机相具体是什么呢,甲醇还是乙腈?还有你说的“有机相比例降低,药物的响应值,明显降低”这个是不是和你的待测物的溶解度有关啊,比如你的样品比较易溶于有机相?
    另外,梯度洗脱一般是改善分离度和峰形啊,跟灵敏度关系不大吧。

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  • dark_wzy

    第10楼2013/03/21

    这是色谱部分的问题,化合物极性大却还用这么高的有机相,肯定是不合适的。降低有机相比例或者更换色谱柱。一般来说,先用高水相把基质往外冲一下,然后再逐渐提升有机相比例,这样可以把待测物和基质进行分离,降低基质效应。

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