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请问各位大侠,GPC峰出现分裂是什么原因?

  • maqaian0806
    2013/04/10
  • 私聊

凝胶色谱(GPC)

  • 悬赏金额:50积分状态:未解决
  • 各位大侠,最近测样遇到些问题,进的每个样品的峰都会在峰的最高处发生分裂,咨询了工程师说可能是柱子被污染了,或是柱子塌陷,但是柱压没怎么升高呢?我现在就是在小流量的冲柱子,但感觉冲下来的希望不大,请问各位大侠有什么好的建议吗?跪求解决办法,先谢过啦
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  • 安平

    第1楼2013/04/10

    应助达人

    有没有搞错过流动相?

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  • 小不董

    第2楼2013/04/13

    应助达人



    帮你付上照片, 这样更直观,不制动你在分析标准样品,单标也是这样吗?流动相和条件是否有改变?

    看你的这个图,应该是用的两根柱子吧,22min,时间不是很够,溶剂峰还没完全出来,如果连续进样,很容易干扰下一个样品的分析。第一个图,若是两个分子量的物质,而且分子量至少相差一个数量级,其实这图很漂亮,分得很好。若说肯定是单一分子量的物质就要考虑。

    第二图,分子量明显小了好多,已经达到柱子的分离极限,不知道你的这柱子分离极限是多少。不过定性的分析,还是可以参i的。

    通过你这两个图的最后一个峰判断,柱子性能 应该还好的,重现性也可以,至于你为什么说现在出现两个峰不正常,只有你才对样品比较了解,可以进个单标,窄分子的标样,进一针再判断是否柱子的原因。

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  • histone1

    第3楼2013/04/17

    窄分布的标样也是这样吗?

    如果是:

    我的建议是,把两根色谱柱分开来,用窄分布标样一根一根试,看还有没有裂峰。

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  • 闻禾

    第4楼2013/04/18

    第一张图是标准品?如果是未知样品,这样的分离也算不错。如果是标品组合,凑合也能用,但可以通过选择分子质量相差更大的标品组配就更好了。

    第二张图表明,所选凝胶柱已不太合适,可以选择更适合小分子测定的凝胶柱,以便得到分离更好,出峰位置更好的GPC曲线。

    题外话:

    在GPC测试中,我们也经常得到与第二张很相似的色谱图,但出峰比较靠中间位置。但因我们的实验主要是为监控实验过程变化,且已采用三根柱子(再加柱子,分析时间就太长了)。我的意思是,满足需要,一切从简。

    小不董(doxw0323) 发表:

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  • tigertooth

    第5楼2013/04/19

    只是从图来看没有什么异常,除非这个样品你以前做过,不是这个样子。

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  • 蚊 子

    第6楼2013/04/26

    楼主搭了个台自己人呢?楼主最好说清楚请,用的什么体系,什么样品,图谱是标样的还是未知样的,不然大家想办你也没办法啊

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