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【金秋计划】+在避免高背压和高剪切时，是在一个较低的流速下运行GPC/SEC（只要你有足够的时间）就足够了，为什么还是说要选择更大颗粒的色谱柱？

memory光阴

2024/09/13

凝胶色谱（GPC）

答：大分子化合物是非常敏感的，所以通过液相色谱（LC）系统以非常高的压力对高分子质量或高分子链施加压力可能会导致高分子链降解，产生片面的结果。系统中的总压力主要取决于流速、流动相粘度、温度、内径、应用的色谱柱数量以及色谱柱固定相的颗粒大小。

当对高分子量化合物进行分析时，应避免使用小颗粒色谱柱。[1] 建议在操作高摩尔质量的样品时使用较大的颗粒尺寸，因为这能够减少剪切应力。同样需要注意的是在这种情况下要使用孔隙率较大的色谱柱，这能够进一步减小剪切应力。实际上对于高摩尔质量的样品来说，如果时间允许的化，大粒径和低流速的组合才是最理想的。如果你使用的是高粘度溶剂，那么同样建议在较高的温度下运行（以降低流动相粘度）。

对于那些低摩尔质量的样品，其中，高分辨率是必须的（例如分离低聚物），但不推荐使用大颗粒色谱柱来克服反压问题。大颗粒会导致较低的平板测数，从而降低分辨率。同样对于使用高粘度溶剂来说，大多数小摩尔质量的样品同样适合高温度和低流速，因为这两种途径都能增加分辨率从而提供更好的质量传输。

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