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反相色谱切换正相色谱流程

三人行

2013/08/03

反相色谱切换正相色谱流程：

1、先将色谱柱用相应的溶剂冲洗干净，然后将色谱柱拆下来密封保存。用双通将进样器与检测器连接。

2、将贮液瓶内装入300ml的二次蒸馏水，将流速渐次提高到2.0ml/min冲洗系统1.5h。注意观察泵压。

3、将流速渐次降到0ml/min，把二次蒸馏水更换为甲醇，将流速渐次提高到2.0ml/min冲洗系统1h。

4、用同样的方法将甲醇更换为异丙醇、四氢呋喃，各冲系统1h。

5、最后将四氢呋喃更换为预先配制好的流动相冲系统1h，同时将柱塞杆清洗系统内的10%异丙醇更换为流动相，保持50-60滴/min的速度清洗柱塞杆。再将双通更换为正相色谱柱，待色谱柱平衡好以后就可分析样品了。

在实际工作中你是怎样切换的呢？

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ECHO007

第1楼2013/08/03

按照操作规程来做，不然出了问题不好处理。

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三人行

第2楼2013/08/03

我们一般是将甲醇更换为异丙醇，几乎不用四氢呋喃。
ECHO007(v2769262) 发表:按照操作规程来做，不然出了问题不好处理。

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ECHO007

第3楼2013/08/04

这样做是出于什么考虑呢？
三人行(jncxyy2012) 发表:我们一般是将甲醇更换为异丙醇，几乎不用四氢呋喃。

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三人行

第4楼2013/08/04

四氢呋喃中易有过氧化物，怕损伤色谱柱。
ECHO007(v2769262) 发表:这样做是出于什么考虑呢？

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御风飘逝

第5楼2013/08/04

如果以前用到过盐类，才会用纯水冲，然后异丙醇，然后直接用到的正相流动相。
如果没有用到盐类，直接异丙醇过滤，然后正相流动相。

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三人行

第6楼2013/08/04

如果正相流动相中没有异丙醇，怎样防止异丙醇对流动相造成污染？
御风飘逝(yuanrui82) 发表:如果以前用到过盐类，才会用纯水冲，然后异丙醇，然后直接用到的正相流动相。
如果没有用到盐类，直接异丙醇过滤，然后正相流动相。

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御风飘逝

第7楼2013/08/04

没有异丙醇，先用少量的流动相清洗管路，然后再换上大量的流动相走基线（避免异丙醇污染流动相）。
三人行(jncxyy2012) 发表:如果正相流动相中没有异丙醇，怎样防止异丙醇对流动相造成污染？

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三人行

第8楼2013/08/04

这个办法比较好。
御风飘逝(yuanrui82) 发表:没有异丙醇，先用少量的流动相清洗管路，然后再换上大量的流动相走基线（避免异丙醇污染流动相）。

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ECHO007

第9楼2013/08/05

有没方法将其试剂中的过氧化物去取掉。
三人行(jncxyy2012) 发表:四氢呋喃中易有过氧化物，怕损伤色谱柱。

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三人行

第10楼2013/08/05

用蒸馏的方法可以去除。
ECHO007(v2769262) 发表:有没方法将其试剂中的过氧化物去取掉。

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