仪器信息网APP

选仪器、听讲座、看资讯

立即体验

当前位置：仪器社区 >色谱 > 毛细管电泳（CE） > 帖子详情

出峰面积不重复

wy20071722

2013/08/23

毛细管电泳（CE）

昨天做实验，用Beckman 的LIF检测器检测荧光标记的DNA，峰面积不重复，相差很大，迁移时间很重复，不知道为什么？

我自己考虑可能有：样品的问题；配样的问题；进样的问题；检测的问题。

我用相同的样品不换样进样峰面积也不重复，这应该排除了配样的问题？

荧光样品淬灭不会那么快吧？两针的时间应该是没问题的吧？

其他的原因就不知道了，现在还没找到原因，求大家帮忙！

分
该帖子已被版主-beyond1977加5积分，加2经验;加分理由:鼓励发帖

相关话题

sl2013

第1楼2013/08/23

路过，我也常遇到这问题。求解释。
wy20071722(wy20071722) 发表:昨天做实验，用Beckman 的LIF检测器检测荧光标记的DNA，峰面积不重复，相差很大，迁移时间很重复，不知道为什么？

我自己考虑可能有：样品的问题；配样的问题；进样的问题；检测的问题。

我用相同的样品不换样进样峰面积也不重复，这应该排除了配样的问题？

荧光样品淬灭不会那么快吧？两针的时间应该是没问题的吧？

其他的原因就不知道了，现在还没找到原因，求大家帮忙！

0

beyond1977

第2楼2013/08/23

应助达人

你的问题是偶然还是一直这样，偶然的话应该算正常的，我们这也会，我怀疑多半是进样量造成的，毕竟进样压力小，时间短

0

分
该帖子已被版主-wy20071722加3积分，加2经验;加分理由:应助

wy20071722

第3楼2013/08/23

我已经有两个月没做实验了，以前不这样的。进样用的是0.5psi，0.5s，不知道什么问题。这个一定要解决的，不然没法做实验。如果要排除其他可能性有没有什么比较好的办法？
beyond1977(xsh6743) 发表:你的问题是偶然还是一直这样，偶然的话应该算正常的，我们这也会，我怀疑多半是进样量造成的，毕竟进样压力小，时间短

0

wy20071722

第4楼2013/08/25

不是偶然这样的。
beyond1977(xsh6743) 发表:你的问题是偶然还是一直这样，偶然的话应该算正常的，我们这也会，我怀疑多半是进样量造成的，毕竟进样压力小，时间短

0

nini2006

第5楼2013/08/26

不知你用什么模式分离。一般情况下DNA吸附严重，如果有吸附现象，重现性肯定不好。

0

beyond1977

第6楼2013/08/26

应助达人

进样时间0.5秒会不会太短了，你试着增大点看看
wy20071722(wy20071722) 发表:我已经有两个月没做实验了，以前不这样的。进样用的是0.5psi，0.5s，不知道什么问题。这个一定要解决的，不然没法做实验。如果要排除其他可能性有没有什么比较好的办法？

0

分
该帖子已被版主-nini2006加3积分，加2经验;加分理由:应助

nini2006

第7楼2013/08/26

0.5秒是有点太短了。量太少误差就大。
beyond1977(xsh6743) 发表:进样时间0.5秒会不会太短了，你试着增大点看看

0

wy20071722

第8楼2013/08/26

谢谢！我一会试试吧，现在晚上十点了，我还在琢磨这个问题。白天问了工程师，他也说可能是进样的问题。我现在换成紫外的，貌似峰面积又挺重复的了。
beyond1977(xsh6743) 发表:进样时间0.5秒会不会太短了，你试着增大点看看

0

ericwong

第9楼2013/08/28

现在还是紫外重复，荧光不重复？

0

wy20071722

第10楼2013/08/28

是的，我刚开始两针之间只用缓冲液冲洗，两针之间峰面积差距非常大，后来加上NaOH冲、水冲就好了很多。看来这东西不能省。

现在的问题是我加上了这些以后峰面积重复性仍然是不理想的，两针之间的峰高能差到10 RFU。
nini2006(nini2006) 发表:不知你用什么模式分离。一般情况下DNA吸附严重，如果有吸附现象，重现性肯定不好。

0

查看更多

近期热榜

热门活动

猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐

品牌合作伙伴

日立科学仪器

珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）

珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）

日本电子株式会社

赛默飞世尔科技

马尔文帕纳科

上海仪电科仪

梅特勒托利多

布鲁克核磁

举报帖子

点赞用户

好友列表

加载中...

正在为您切换请稍后...