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细胞拉曼光谱检测

  • muziqianli
    2013/09/04
  • 私聊

拉曼光谱

  • 求助各位大侠,有没有测过细胞的拉曼光谱。我们用的雷尼绍的仪器,785nm激发光,背景信号太强,一点细胞的信号都测不出,怀疑激光没有聚焦在细胞上。

    1. 细胞测量前要怎么处理?

    2. 细胞放在什么样的载玻片上测量,怎样减小背景影响?

    3. 仪器参数设置上有什么需要注意的么?怎样确定把光聚焦到细胞上?

    老板逼得紧,谢谢各位啊!
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  • 拉曼论坛

    第1楼2013/09/11

    有测细胞的报道,中文文献都有很多,你去搜索一下看看吧

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  • muziqianli

    第2楼2013/09/25

    我已经看过很多文献了,照着文献上写的做实验都做不出来,很多文献也写的不清楚,所以想问问真正做过细胞实验的人。您做过细胞光谱实验吗?

    拉曼论坛(nanbowan) 发表:有测细胞的报道,中文文献都有很多,你去搜索一下看看吧

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  • 拉曼论坛

    第3楼2013/09/26

    我做过拉曼标记物质进入细胞之后的拉曼,但是测的是标记物的信号,没有测过细胞本身的信号。

    细胞也混合物,而拉曼表征的最好是单一分子结构的物质,否则就存在检测限的问题,如果这个混合物每一种的含量都很少,或者其中有荧光很强的分子,那么很难测到信号。

    另外是不是得对细胞进行前处理啊?

    muziqianli(muziqianli) 发表:我已经看过很多文献了,照着文献上写的做实验都做不出来,很多文献也写的不清楚,所以想问问真正做过细胞实验的人。您做过细胞光谱实验吗?

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  • shengsh

    第4楼2013/09/29

    细胞检测是很难做:样品处理,信号采集
    文献上别人用拉曼成像做的图很漂亮,看起来很吸引人,
    国内能做好这一块的还真不多,广西那边做光镊拉曼的课题组,主要做细胞
    不过他的技术和共聚焦显微镜技术不同

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  • 天狼

    第5楼2013/10/06

    做细胞的成像难度很大,关键在于共聚焦。
    另外建议你785激发时,不要用玻璃,激光穿透深度很大时,衬底信号很强。

    532激发也可以的

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  • muziqianli

    第6楼2013/10/08

    我们实验之前有对细胞进行离心和清洗,开始用的是PBS,影响信号太大,后来换成蒸馏水,这种情况下细胞又很快就吸水涨破了。关键还是细胞的信号太弱,测不出信号。现在用铝片做载玻片,因为不透光,又很难找到细胞。。

    拉曼论坛(nanbowan) 发表:我做过拉曼标记物质进入细胞之后的拉曼,但是测的是标记物的信号,没有测过细胞本身的信号。

    细胞也混合物,而拉曼表征的最好是单一分子结构的物质,否则就存在检测限的问题,如果这个混合物每一种的含量都很少,或者其中有荧光很强的分子,那么很难测到信号。

    另外是不是得对细胞进行前处理啊?

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  • muziqianli

    第7楼2013/10/08

    对,国内做细胞拉曼主要就是广西那块,他们用的是光镊技术,能捕捉到细胞。

    shengsh(shengsh) 发表:细胞检测是很难做:样品处理,信号采集
    文献上别人用拉曼成像做的图很漂亮,看起来很吸引人,
    国内能做好这一块的还真不多,广西那边做光镊拉曼的课题组,主要做细胞

    不过他的技术和共聚焦显微镜技术不同

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  • muziqianli

    第8楼2013/10/08

    我们现在换成633的了,之前用过石英,氟化钙当衬底,都不行,现在用的铝片。您做过532的吗?

    天狼(v2683155) 发表:做细胞的成像难度很大,关键在于共聚焦。
    另外建议你785激发时,不要用玻璃,激光穿透深度很大时,衬底信号很强。

    532激发也可以的

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  • 天狼

    第9楼2013/10/10

    用过488,532,633和785测试细胞成像,结果还不错

    muziqianli(muziqianli) 发表:我们现在换成633的了,之前用过石英,氟化钙当衬底,都不行,现在用的铝片。您做过532的吗?

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